目的:发病率越来越高的乳腺癌是激素依赖性恶性肿瘤,手术治疗是其首要治疗手段,而内分泌治疗是防止乳腺癌患者复发和转移的又一重要治疗手段。但内分泌治疗引起的相关性血脂异常事件已经成为影响乳腺癌患者生活质量的突出问题,它的防治已成为迫切需要解决的问题。随着人们对中医药的重视度越来越高,中医药在肿瘤方面的临床治疗和基础研究也越来越倍受重视,发现中医药不仅可以调节免疫微环境,促进肿瘤休眠或凋亡,而且还可以联合西药达到增效减毒的作用,从而提高患者的生存质量,延长患者的生存时间。中医整体辨证论治,疏肝健脾法是乳腺癌内分泌治疗相关性血脂异常的主要治法,具有独特的优势。既往研究提示,肝脏雌激素受体α(ER α)是取决于雌激素的生理效应强弱的靶器官,而肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)同时又是调控血脂的关键受体,当LDLR减少时,血脂代谢就会异常,引起血脂异常。本人推测体内激素水平对血脂的影响可能是由于体内ER α受体的减少,引起肝脏上LDLR数量减少来实现的,并且疏肝健脾法也是通过ER α-LDLR来改变体内微环境,从而达到改善乳腺癌内分泌治疗引起的相关性血脂异常的作用的。本研究一方面通过临床病例回顾性研究,分析乳腺癌内分泌治疗、血脂异常及疏肝健脾法的相关性;另一方面通过体内实验明确疏肝健脾法对乳腺癌内分泌治疗后血脂异常的干预作用及ER α-LDLR介导的通路在内分泌治疗相关性血脂异常的调控机制。最终阐明疏肝健脾法对ER α-LDLR介导的通路在内分泌治疗相关性血脂异常的调控作用,为其临床应用及进一步研究中药复方治疗内分泌治疗相关性血脂异常提供理论依据。方法:本研究分两部分进行,第一部分:采用病例回顾性分析方法,收集2016年9月至2018年9月期间在广东省人民医院中医科与乳腺科门诊及住院部正在接受或己经完成内分泌治疗的乳腺癌患者病例,将其分为对照组(内分泌治疗后无进行其他血脂药物干预)、疏肝健脾法组(内分泌治疗后采用疏肝健脾方干预血脂)2组,分别归纳各组基本情况、内分泌治疗方案、血脂情况、干预方法(未干预、疏肝健脾法)和结局,总结分析乳腺癌患者内分泌治疗与血脂异常、疏肝健脾法的相关性。第二部分:运用体内实验,在C57BL/6小鼠上建立内分泌治疗相关性血脂异常模型,分别进行疏肝健脾方和阿托伐他汀进行干预,实验分为正常对照组(未进行内分泌治疗)、模型组、阿托伐他汀组、疏肝健脾方低、中、高剂量组6组,分别观察各组小鼠一般情况、血清雌激素和孕激素水平、血脂水平、运用PCR、Western blot及免疫组化检测肝脏ER α、PR、LDLR表达情况。结果:一、乳腺癌患者内分泌治疗、血脂异常及疏肝健脾法的相关性(1)纳入研究的56例病例分类为为空白对照组20例、疏肝健脾法组36例。与空白组比较,疏肝健脾法组患者的年龄明显较高,差异具有统计学意义(P<0.05),而两组的平均BMI指数没有明显差异(P>0.05);所有组别在内分泌治疗前未绝经的患者,在接受内分泌治疗后均达到了绝经状态。(2)两组的内分泌治疗方案基本没有明显的差别,总体偏选择性雌激素受体调节剂的方案较多;与空白对照组比较,疏肝健脾法组总体疗程有明显差异,具有统计学意义(P<0.05)。(3)从各组内分泌治疗前后血脂水平可看出,内分泌治疗前,各组血脂水平各指标(总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)),总体都是正常的,且组间血脂水平各项均无明显差异,而内分泌治疗后,与内分泌治疗前比较,各组TC、TG及LDL-C均较前升高,且差异具有统计学意义(P<0.05);各组HDL-C均较前降低,但差异均无统计学意义(P>0.05)。(4)疏肝健脾方干预后,与空白对照组血脂水平对比,疏肝健脾法组的TC、TG和LDL-C均较低,HDL-C较高,但是只有TG、HDL-C差异显著,具有统计学意义(P<0.05);与内分泌治疗后血脂水平对比,疏肝健脾法组的血脂水平均有一定的改善,但是只有TC和LDL-C的降低较显著,差异具有统计学意义(P<0.05),而TG的降低和HDL-C的升高均无明显差异,但与内分泌治疗前血脂水平对比,疏肝健脾法组的血脂水平均有一定的异常,且TC、TG和LDL-C的升高有显著差异,具有统计学意义(P<0.05),而只有HDL-C的降低无显著差异(P>0.05)。(5)疏肝健脾法组疏肝健脾方干预的总体疗程为(3.78±1.74)月、疗效达94.44%。二、疏肝健脾法对ER α-LDLR介导的通路在内分泌治疗相关性血脂异常的调控作用(1)从各组小鼠一般情况看出,在整个实验过程前和实验后,各组小鼠体重比较均无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。(2)从各组小鼠血清雌激素、孕激素水平可看出,与空白对照组比较,模型组、阿托伐他汀组和疏肝健脾方低、中、高剂量组的血清雌激素、孕激素水平都有所下降,但是各组均只有雌激素水平有明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05),而各组孕激素水平下降无显著差异(P>0.05);与模型对照组比较,阿托伐他汀组和疏肝健脾方低、中、高剂量组的血清雌激素水平有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05),而各组孕激素水平相当,均无明显的差异(P>0.05)。(3)从血脂水平可看出,与空白对照组比较,模型组的血清TC、TG、LDL-C水平均有所上升,HDL-C水平有所下降,这提示我们内分泌治疗后的小鼠血脂会有一定的异常;与模型对照组比较,阿托伐他汀组和疏肝健脾方低、中、高剂量组的血清TC、TG、LDL-C水平均有所下降,HDL-C水平有所升高,且除疏肝健脾方低剂量组的TC和HDL-C、疏肝健脾方高剂量组的TG和阿托伐他汀组和疏肝健脾方低、中、高剂量组的LDL-C水平无显著性差异外,其余各组各指标均有显著性差异(K0.05)。(4)从PCR测肝脏ER α、PR、LDLR表达情况来看,与空白对照组比较,模型组的肝脏ERα、PR、LDLR表达情况明显下降,差异具有统计学意义;与模型对照组比较,阿托伐他汀组肝脏ER α、PR、LDLR表达情况均无显著性差异(P>0.05),疏肝健脾方低、中、高剂量组的肝脏ER α、PR、LDLR表达情况均有所升高,且疏肝健脾方高剂量组肝脏的ERα、LDLR表达水平升高最明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot和免疫组化测肝脏ER α、PR、LDLR表达情况基本和PCR结果相一致。结论:通过临床病例回顾性分析得出,乳腺癌患者内分泌治疗与血脂异常有密切的联系,血脂异常是内分泌治疗带来的不良反应之一,这类血脂异常患者通过疏肝健脾法干预后,血脂有一定的改善;体内动物实验验证了疏肝健脾法、内分泌治疗与血脂异常的相关性,并且得出了内分泌治疗相关性血脂异常可能是通过ER α-LDLR介导的通路引起的。内分泌治疗使体内ER α表达水平下降,引起体内激素水平的下降,进而阻碍了 LDLR的转录使其表达水平也下降,最终引起血脂异常。健脾疏肝法对乳腺癌内分泌治疗相关性血脂异常有一定的改善作用,而且其作用机制正是通过ER α-LDLR介导的通路来实现的,提高ER α、LDLR的表达,使体内激素水平维持在一个既不增加乳腺癌复发转移的风险,又对血脂影响最小的一个平衡点。