应用shRNA下调乳腺癌细胞survivin基因表达促进细胞凋亡及逆转耐药的研究

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第一部分 survivin基因在乳腺癌细胞株MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr的表达 目的 检测乳腺癌细胞株MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr中survivin基因在mRNA及蛋白水平的表达,以及两种细胞的细胞周期分布。 材料与方法 常规培养乳腺癌细胞株MCF-7、MCF-7/Adr及慢性白血病细胞株K562/AO2。设计并合成survivin引物,提取细胞总RNA,以K562/AO2细胞作为阳性对照,经RT-PCR反应,以β-actin作为内对照,进行半定量分析。用免疫细胞化学SABC法检测survivin蛋白表达,经流式细胞仪分析细胞周期和增殖指数。 结果 survivin mRNA在MCF-7、MCF-7/Adr及阳性对照K562/AO2均有表达,其中MCF-7/Adr的survivin表达约为MCF-7的3.76倍,但二者survivin表达均低于阳性对照。Survivin蛋白在胞核及胞浆均有表达,但以胞核表达为主。其中MCF-7/Adr和阳性对照K562/AO2为强阳性表达,MCF-7为阳性表达。经流式细胞仪检测,MCF-7/Adr和MCF-7的G2/M期细胞比例分别为15.25±4.96%和12.25±4.18%,增殖指数分别为58.98±12.45%和44.23±14.99%。
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