聚碳酸酯膜及毛细管微纳界面上的定位浓集与芯片电泳联用研究

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在芯片电泳中进样量的限制影响了其对低浓度样品的检测。基于离子浓度极化作用的富集对提高分析物的浓度从而提高检测能力有着重要作用。将基于离子浓度极化的微量样品在线预浓集与芯片电泳结合对提高微流控芯片分析性能有重要意义。第一章对基于离子浓度极化原理的微纳流控浓集原理、装置及应用作简单介绍,对毛细管电泳进样方式进行阐述,最后讨论芯片电泳分离技术与浓度极化富集原理联用的现状及存在的问题。第二章基于聚碳酸酯纳米多孔膜(PCTETM),通过聚二甲基硅氧烷(PDMS)浇铸法形成圆形微纳界面,借助电化学工作站及理论模型表征微纳界面的纳米孔个数。考察了缓冲溶液、电压对微纳界面浓集效应的影响,发现在电压低于150 V时,离子强度增大富集效果减弱,电压增大之后,电场强度弥补了离子强度对荧光素钠的富集差异。最终在1×TBE 250V下对1×10-6mol/L荧光素钠实现了103浓集倍数,并实现了对lambdaDNA的富集。第三章以毛细管柱上狭缝为样品引入通道,Nafion多孔膜与毛细管形成微纳界面对探针分子定位浓集,最终进行毛细管电泳分离。实验中探讨了进样狭缝宽度与样品进样的关系,进样峰高随狭缝宽度增加呈先增长后下降的趋势,根据峰高及半峰宽确定了最佳的进样狭缝宽度在70-140 nm之间,并实现了对DNA Marker的进样分离。通过对进样富集方式探讨,最终在分步进样电压300 V、进样时间9s,富集电压300 V、富集时间180 s下实现了DNA Marker定位富集分离,并改善了因进样量增大导致的色谱峰展宽。考察并证实了分离场强、有效分离长度等是影响峰型重叠的因素。本文建立PDMS-PCTETM芯片,制作方法简单,不需要复杂的微机械加工,微纳界面浓集重现性好,方法简单可靠。将DNA狭缝进样、微纳界面富集、毛细管电泳无胶筛分分离集于一体的毛细管微芯片在改善电泳分离灵敏度、样品浓度要求方面有着重要作用。
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