HMGB1对体外人肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

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目的:观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对体外人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖、迁移和凋亡的影响。方法:体外培养人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)至5~8代,然后开始实验。配制含不同浓度HMGB1 (Ong/ml、1 ng/ml、10 ng/ml、100 ng/ml和1000 ng/ml)的培养液,体外分别培养24小时和48小时后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的HMGB1对HPASMC细胞生长增殖率的影响。利用Boyden小室法检测穿膜细胞数,观察含不同浓度HMGB1的无血清培养基对HPASMC体外培养20小时的趋化作用。用TUNEL法检测不同浓度HMGB1对HPASMC作用48小时后细胞凋亡情况的影响。结果:(1)MTT法检测显示HMGB1对HPASMC细胞作用24小时或48小时后,与阴性对照组相比,实验组细胞增殖率明显升高,随着HMGB1浓度增加,细胞增殖率升高(P<0.01),并在HMGB1浓度为100ng/ml时达到平台,且经HMGB1处理48小时后细胞增殖率高于24小时对应浓度组(P<0.05)。(2)Boyden小室法趋化实验显示随着HMGB1浓度升高,穿膜细胞数增加(P<0.01),且HMGB1浓度为100 ng/ml时趋化作用达到峰值,HMGB1浓度为1μg/ml时趋化作用略减弱。(3) TUNEL法检测细胞凋亡结果显示,不同浓度HMGB1 (Ong/mL1 ng/ml、10 ng/ml、100 ng/ml和1000 ng/ml)干预48小时后,对照组和各实验组的细胞凋亡率分别为8.56%,8.22%,7.61%,7.50%和7.11%(P>0.05)。结论:1.HMGB1具有促进HPASMC进行细胞增殖和迁移的作用,且该作用对HMGB1具有浓度依赖性,在HMGB1浓度为100ng/ml时达到峰值。2. HMGB1对HPASMC的细胞凋亡无明显影响。3. HMGB1通过诱导HPASMC增殖和迁移来促进肺血管重构。
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