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研究背景炎症性肠病是一组发病原因尚不明确的亚急性和慢性肠道炎症性疾病,其临床类型主要包括UC和CD。现在普遍认为CD是Thl细胞异常激活引起的疾病。维生素D近年来被发现在多种自身免疫性疾病中有重要的免疫调节作用,尤其是Thl细胞介导的自身免疫疾病。维生素D对免疫的调控可以通过多个途径达到,其中之一就是调控APC上的TLRs家族的表达及功能。通过TLRs信号通路可影响初始T细胞的分化,改变Thl细胞和Treg细胞在组织中的比例。目前有国外研究小组在动物实验上使用1,25(OH)2D3干预,发现1,25(OH)2D3有抑制炎症性肠病肠道炎症的作用。但尚无使用维生素D3及其不同剂量对于IBD疗效比较的研究。研究目的探索维生素D3和1,25(OH)2D3对IBD动物模型的疗效及其可能的免疫机制。研究方法54只SD大鼠随机分为9组,每组6只,分为：空白对照组,TNBS组,5-ASA (0.4g/kg/d)组,活性VD(1,25(OH)2D30.2ug/kg/d)组,活性VD(1,25(OH)2D30.2ug/kg/d)+5-ASA(0.4g/kg/d)组,大剂量维生素D3(7500IU/d)组,大剂量维生素D3(7500IU/d)+5-ASA(0.4g/kg/d)组,小剂量维生素D3(1800IU once)组,小剂量维生素D3(1800IU once)+5-ASA(0.4g/kg/d)组。治疗9天后于第10天处死取材。采用DAI评分,大体炎症评分,组织病理评分和结肠组织MPO测定来进行炎症程度的评估。采用免疫组化的方法评估TLR4、TLR9、Foxp3在各组大鼠结肠局部中的表达。并用RT-PCR法测定大鼠结肠组织中TLR9mRNA的含量。实验结果1、各TNBS处理组DAI评分、大体评分、组织病理学评分和MPO测定均较空白对照组明显升高(P<0.01)。各治疗组结肠组织MPO值均显著低于TNBS组(P<0.01),但仍高于空白对照组。各治疗组DAI评分、大体评分和组织病理学评分较TNBS组无明显下降(P>0.05)。各治疗组之间疗效无明显差异(P>0.05)。大剂量VD组和大剂量VD+5-ASA组血清钙显著高于其余各组(P<0.01)。大剂量VD组血清肌酐高于其余各组(P<0.05)。2、空白对照组结肠固有层和粘膜下层炎性细胞胞膜和胞质仅有少量TLR4和TLR9表达。TNBS造模组可见大量TLR4和TLR9表达,较空白组明显增多(P<0.01)。在空白对照组中仅有散在的Foxp3表达,主要不均匀分布于粘膜固有层淋巴细胞的细胞核内。TNBS组中Foxp3表达较空白组明显增多(P<0.01)。单纯5-ASA治疗组TLR4、TLR9和Foxp3表达较TNBS组弱(P<0.05)。各维生素D干预组TLR9和Foxp3表达较TNBS组弱(P<0.05),而TLR4表达较TNBS组无明显差异(P>0.05)。各维生素D干预组之间TLR4、TLR9和Foxp3表达无明显差异(P>0.05)。TLR9mRNA在空白对照组中表达较少。各组之间条带灰度比值无差异(P>0.05)。实验结论1、5-ASA、维生素D3和1,25(OH)2D能缓解大鼠结肠炎症,联合使用维生素D3和5-ASA及联合使用1,25(OH)2D和5-ASA疗效无增强。维生素D3抑制炎症的作用和剂量无关。2、正常大鼠结肠中TLR4、TLR9和Foxp3的表达较少。3、TNBS诱导的大鼠结肠组织中TLR4、TLR9和Foxp3表达增多。与TNBS组比较,5-ASA干预后上述三者表达均可被下调；1,25(OH)2D3或维生素D3干预后TLR9和Foxp3表达减少,TLR4表达无明显差异；不同剂量维生素D3干预后TLR4、TLR9和Foxp3的表达无明显差异。联合使用1,25(OH)2D3和5-ASA、维生素D3和5-ASA较单独使用5-ASA结肠TLR4、TLR9和Foxp3的表达无明显差异。各组TLR9在mRNA层面表达无明显差异。