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研究目的探讨小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白(MYOC)基因、细胞色素P450超家族1亚家族(CYP1B1)基因与原发性开角型青光眼(POAG)家系之间的发病关系。研究对象家系G-05:3代POAG家系,共采集到5份血样,其中2人患病,2人可疑,其余人正常。家系G-04:5代POAG家系,共11人患病,采集到的15份血样中6人为患者,3人可疑,其余人正常。2个家系中的患者均已行手术治疗。研究方法(1)对2个家系20人进行严格的眼科检查;(2)抽取2个家系中8个患者及余下可疑者和正常者的外周血4ml;(3)使用Wizard Genomic DNA Purification试剂盒提取和纯化20位家系成员外周静脉血中的基因组DNA(gDAN);(4)参照已知青光眼致病基因MYOC和CPY1B1的DNA序列,设计和合成相应的PCR(polymerase chain reaction聚合酶链反应)引物5对,各选择2个家系中的一位患者的gDNA作为模板,应用PCR技术扩增MYOC及CYP1B1基因的编码外显子及剪切链接区域;(5)将PCR产物纯化并进行正向和反向测序;(6)将测序结果与正常人MYOC基因、CYP1B1基因序列进行对比分析,若发现突变,继续对家系中其他人做突变位点的筛查。研究结果2个家系的20人中,家系G-05家系及家系G-04均发现位于MYOC的突变,均符合常染色体显性遗传伴不完全外显率。G-05中3人(2名患者及1名可疑者)携带突变MYOC/R46X(c.C136T),即位于MYOC 1号外显子上第46位密码子中第1位碱基的杂合突变C>T(c.C136T),是一个无义突变,终止密码子替换编码精氨酸的密码子(UGA→Stop,p.R46X),最终翻译为一个仅有45个氨基酸的截短蛋白。G-04中6名患者、3名可疑者及1名正常者携带突变MYOC/P370L(c.C1109T),即3号外显子上第370位密码子中第2位碱基的杂合突变C>T(c.C1109T),脯氨酸突变为亮氨酸(p.Pro370Leu)。两个家系均未发现位于CYP1B1的基因突变。研究结论MYOC基因的突变R46X、P370L分别是G-05、G-04家系的致病突变基因,且Pro370Leu与临床表型严重的POAG紧密相关。基因筛查可作为POAG早期诊断一种有效方法,对POAG的可疑者及患者做出预警并指导早期干预治疗。