基于微滴的显微拆蛋系统构建及实验研究

来源 :苏州大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:zhangxizi
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随着生命科学的飞速发展,对细胞的操作已经成为前沿研究热点,其中卵细胞拆蛋是辅助生殖中至关重要的操作之一。现有的卵细胞拆蛋方法大多还是手动操作,可重复性差、成功率低,丟卵现象时有发生,因此对卵细胞显微拆蛋的研究就十分有意义和价值。本文以提高拆蛋效率和成功率为目的,搭建了拆蛋微滴制备系统和显微操作平台,利用计算机控制完成微滴内小鼠卵细胞的拆蛋实验研究。首先,分析了皿内微滴制备和盖油的机理,对微滴内卵细胞的扫描识别进行了分析,然后分析了微针内卵细胞运动的机理,建立相应物理模型分析微针内卵细胞位移与微量泵活塞速度的关系。其次,针对拆蛋的要求搭建微滴制备系统,编写了触摸屏和PLC程序进行人机交互和运动控制。接着根据前文理论分析总结出要点,选择合适的运动执行系统和显微视觉系统,将各个模块的执行部件和驱动器正确连接,再连接到工控机上,组成显微拆蛋硬件系统。再次,分析显微拆蛋系统的屏幕坐标、平台坐标和实物坐标的转换关系,并校正相机偏角,根据三点定圆算法编写相应的应用程序界面、图像采集界面和图像参数调整界面,将各个功能模块集成在一起,设计出人机交互界面。最后,对制备液滴的体积精度、定位精度和高径比进行分析,利用制备液滴以小鼠卵细胞进行实验研究,分别进行了剥卵针深度定位实验、卵细胞扫描和定位实验、卵细胞拆蛋实验、卵细胞液滴间转移实验,并进行了结果分析。实验结果表明本文中基于微滴的显微拆蛋方法提高了拆蛋效率和成功率,在50~60s内完成卵细胞的拆蛋操作,成功率比手工提高了17.3%。
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