17β-雌二醇对缺氧损伤的人视网膜色素上皮细胞表达VEGF的影响

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目的研究实验性缺氧损伤的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率的变化情况及17β-雌二醇对两者的影响。方法制备人视网膜色素上皮细胞氯化钴缺氧损伤模型,实验分三部分:(1)单纯氯化钴缺氧损伤对RPE细胞影响的研究;(2) 17β-雌二醇对氯化钴缺氧损伤影响的研究;(3)它莫西芬和17β-雌二醇共同预处理对RPE细胞氯化钴缺氧损伤影响的研究;采用比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率,细胞免疫化学法定性定量检测VEGF蛋白的表达,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量测定VEGF基因表达情况。结果(1)氯化钴可以引起RPE细胞VEGF表达的升高,随着氯化钴作用浓度的增加,VEGF表达及LDH的释放率均呈浓度依赖关系。随着氯化钴作用浓度的增加,VEGF的表达和LDH释放率是递增的(P<0.05);(2)随着17β-雌二醇浓度的增加,VEGF的表达和LDH释放率是递减的(P<0.05);(3) 17β-雌二醇作用被其拮抗剂它莫西芬阻断后,VEGF表达和LDH释放率与缺氧损伤组无明显变化,差别无统计学意义(P>0.05)。结论:VEGF在缺氧损伤的视网膜色素上皮细胞中表达增强;17β-雌二醇可以抑制VEGF的表达和降低LDH的释放率,对RPE细胞的缺氧损伤发挥一定保护作用,这个作用可以为其受体阻断剂它莫西芬阻断。
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