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动物烈性传染性疾病是威胁动物及人类生存的一类传染病，一旦爆发将会造成灾难性的后果。疫苗接种是预防此类传染病的有效方法。传统的灭活疫苗在动物传染性疾病的防治中发挥了重要的作用，但其在制作方法和应用效果上还有不足之处。其中之一是现行使用的矿物油佐剂有一定的副作用和较低的细胞免疫效果。因此提高疫苗免疫效果的重要方法之一是对佐剂进行改良。左旋咪唑(LMS)最初应用于去除动物体内寄生虫的化学药物。许多研究证明LMS是一种良好的免疫增强剂，它能使受抑制的吞噬细胞和淋巴细胞功能恢复正常，而且LMS还应用于癌症的免疫治疗上。本实验室也证实DIS作为口蹄疫DNA疫苗的佐剂，不但产生了提高口蹄疫的体液免疫反应，更重要的是能够刺激机体产生较强的细胞免疫反应。因此为了研究LMS作为口蹄疫灭活疫苗的佐剂效果，并进一步探讨LMS作为佐剂增强免疫反应的作用机理。本研究利用不同浓度的LMS与口蹄疫灭活抗原146S混合免疫BAI-B/c和C57 BL/6小鼠，检测产生的体液和细胞免疫水平。结果表明在免疫后42天，2％的LMS诱导产生了较高水平的IgG：而0.5％的LMS刺激产生了较强的T细胞增殖反应。为进一步探讨LMS作为佐剂增强免疫反应的作用机理，本研究还进一步对在LMS影响下，免疫系统对抗原提呈过程中起重要作用的MHC，共刺激分子，及负反馈分子SOCS1和SOCS3进行检测。结果表明LMS可能是通过提高MHC分子和共刺激分子在抗原提呈细胞(APC)上的表达，进而提高了免疫反应水平。同时还证明矿物油佐剂造成低水平细胞免疫能力可能是由于上调了负反馈分子SOCS1和SOCS3的表达，从而抑制了其细胞免疫水平。以上研究结果表明LMS可以作为灭活疫苗的佐剂增强其免疫效果。
DNA疫苗能产生体液免疫反应，尤其是能够有产生细胞免疫反应的优点，在许多疫苗研究中已经取得很大进步，但在大动物和人体中的免疫效力尚不理想。而传统的灭活疫苗能够诱发产生较高的抗体水平，但细胞免疫水平较弱。因此我们设想将口蹄疫DNA疫苗与蛋白疫苗混合免疫小鼠，以期利用各自优势免疫方案提高整体免疫水平。结果出乎我们的预料，结果发现混合免疫小鼠产生的抗体水平很高，但T细胞增殖反应却受到抑制，IFN-γ和IL-2表达水平也相应的降低。为进一步验证这种免疫抑制现象的普遍性，本研究分别利用猪瘟病毒(CFSV)抗原和人乙肝病毒S抗原(HBsAg)为蛋白疫苗与两种相应的DNA疫苗混合免疫，同样产生了Th1 T细胞免疫抑制。结果表明DNA与蛋白疫苗混合免疫产生的抑制T细胞活性是一种普遍存在的的现象。实验进一步证明将DNA疫苗与蛋白疫苗分开小鼠左右腿注射，仍会抑制T细胞活性，表明只要DNA疫苗与蛋白疫苗同时出现与小鼠体内，就会产生T细胞抑制；而当DNA疫苗与非同源编码的蛋白疫苗共同免疫时，则不会产生此种免疫抑制结果，证实这种抑制只有当DNA疫苗与其同源编码的蛋白疫苗共同免疫才会产生，所以具有抗原特异性。
为进一步研究这种免疫抑制现象的产生机制，将免疫后小鼠的T细胞进行细胞过继转移和混合淋巴细胞反应(MLR)表明转移后的T细胞仍然具有抑制作用，不但能在体内抑制抗原特异性的细胞免疫反应，还能在体外以非抗原特异性的方式发挥抑制作用。为证明这种抑制作用与体内存在的天然Treg细胞相关性及其T细胞亚型，本研究利用纯化得到CD4+，CD8+，CD4+CD25-的T细胞亚群，进行T细胞增殖反应，T细胞过继转移和MLR实验。结果表明DNA疫苗与灭活疫苗联合免疫诱导的免疫抑制现象是由CD4+CD25-1细胞亚群产生，它们并具有Foxp3和IFN-γ高表达特性。说明DNA疫苗与灭活疫苗联合免疫诱导了一类新型的CD4+CD25-Treg细胞。此类细胞如何发挥免疫抑制功能仍然在研究中。总而言之，本研究证实了LMS是一种良好的病毒灭活疫苗免疫增强剂，也为其成为灭活疫苗佐剂应用研究提供了理论依据．本研究还发现了DNA疫苗与灭活疫苗联合免疫产生了T细胞免疫抑制现象，其抑制作用是由一群新的抗原特异性Treg细胞(CD4+CD25-T细胞)产生的。此类抗原特异性Treg细胞的发现为Treg细胞家族增加了新的成员，并为诱导产生Treg细胞提供了一种简单有效的方法。为探索不同抗原途径进入机体产生的T细胞免疫调节调控和免疫与抗原相互作用关系提供了一种新的路线；也为Treg细胞应用于预防和治疗自主免疫性疾病提供了一条新思路。