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【背景与目的】人脐带间充质干细胞(human umbilical mesenchymal stem cells, HUMSCs)因其具有比骨髓来源的间充质干细胞更强的增殖能力和更低的免疫排斥性,已成为目前替代疗法、细胞移植和基因治疗首选的成体干细胞类型。但近年来提出的体外培养的成体干细胞自发恶性转化现象及肿瘤干细胞理论提示我们:HUMSCs在体外培养过程中可能存在“安全隐患”。本研究旨在探讨HUMSCs恶性转化的可能性,为其临床应用前的安全性检测提供可借鉴的检测模式及探索有效的预防恶性转化的方法。 【材料与方法】采用组织块贴壁法获得10批不同脐带来源的HUMSCs;将第3代生长良好的HUMSCs分成3组,基础培养基组,DMSO培养组和3-甲基胆蒽(3-MCA)诱导组;通过观察细胞的形态差异、生长速度、存活时间、相对端粒长度、端粒酶活性及染色体的变化情况检测细胞是否进行恶性转化;将细胞注入裸鼠皮下,待包块长出后取出包块组织行病理学免疫组化鉴定,并对其进行肿瘤细胞原代培养及单克隆纯化。 【结果】10批基础培养基组及DMSO培养组细胞生物学特征相似,细胞生长速率随着传代次数增加逐渐变慢,传代平均49天后均进入细胞衰老期,并逐渐凋亡,细胞形态无明显改变,检测细胞端粒酶无活性,细胞相对端粒长度逐渐缩短,染色体G显带同正常人染色体,裸鼠成瘤实验中裸鼠自然死亡均未见包块生长。10批3-MCA诱导组中仅2批细胞出现恶性转化现象,表现出肿瘤细胞的特征:细胞形态变圆,密度高时成铺路石样、生长存活时间延长、生长速度增快、端粒酶有活性及相对端粒长度无缩短;将此细胞注射于裸鼠皮下可形成包块,HE染色及免疫组化提示为肉瘤或低分化肿瘤;肿瘤细胞常染色体显示为人源性细胞。 【结论】本实验证实HUMSCs经长期体外培养未发现恶性转化,在体外培养不存在安全隐患;而经3-MCA诱导后小部分HUMSCs可发生恶性转化,能诱导出恶性肿瘤,其病理类型可能为肉瘤或低分化肿瘤,在体外培养的过程中可能存在安全隐患,其临床应用的安全性仍有待证实。