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手性环氧氯丙烷是一种重要的有机合成中间体,是合成美托洛尔、阿普洛尔、阿替洛尔等的关键中间体,市场需求广泛。目前生产方法主要使用Salen-Co化学催化剂动力学拆分外消旋环氧氯丙烷,而用微生物法制备手性环氧氯丙烷具有反应条件温和,环境友好,成本低,符合绿色化学的要求。本论文主要围绕卤代醇脱卤酶生产菌和环氧化物水解酶产生菌的筛选、菌种的鉴定,培养条件的优化等几方面展开研究。首先,本文通过两种筛选模型,从土壤中筛到11株能产卤代醇脱卤酶的菌株和5株能产环氧化物水解酶的菌株。其中编号ZJB-09102的菌株产卤代醇脱卤酶催化生产环氧氯丙烷的活力最高,通过形态学、生理生化特征、16S rDNA序列及系统发育分析,该菌株被鉴定为Pseudomonas putida ZJB-09102;其中编号为09103的菌株产环氧化物水解酶拆分外消旋环氧氯丙烷得到的(S)-环氧氯丙烷的选择性最高,通过形态学、分子生物学鉴定及系统发育学分析,该菌株被鉴定为Aspergillus niger ZJB-09103。通过单因素实验对P.putida ZJB-09102发酵生产环氧氯丙烷的培养条件进行了优化。确定了较佳的培养条件:淀粉14.0g/L,酵母粉5.0g/L,蛋白胨5.0g/L,硫酸铵0.6g/L,KH2PO4 0.4 g/L,K2HPO4 0.8 g/L,MgSO4 0.4 g/L,pH 7.0,装液量60ml/250ml,接种量2%(v/v),30℃,150rpm摇床培养32h后,发酵培养基中投加0.6%(v/v)底物1,3-二氯丙醇,继续培养48h。在上述条件下,产物环氧氯丙烷的产量达到1.62g/L,比优化前初始培养条件下环氧氯丙烷的产量(0.72g/L)提高了125%。通过单因素和响应面法对A.niger ZJB-09103产环氧化物水解酶的培养条件进行了优化。确定了较优的培养条件:淀粉17.56g/L,豆饼粉3.89 g/L,蛋白胨4.03 g/L,KH2PO4 0.4 g/L,K2HPO4 0.8 g/L,MgSO4·7H2O 0.4 g/L,pH 6.5,接种量1.0%(v/v),装液量100ml/500ml,30℃,培养4d。在上述条件下进行摇瓶发酵培养,环氧化物水解酶的酶活力达到149.98U/L,比优化前初始发酵条件下的酶活力提高了233.73%。论文最后以较优培养条件下获得的A.niger ZJB-09103菌体为生物催化剂,考察环氧化物水解酶催化过程中(S)-环氧氯丙烷e.e.值和产率的变化。当催化反应时间为10 h时,获得的(S)-环氧氯丙烷e.e.≥99.0%,产率为18.6%。