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本研究以叶下珠为研究对象,建立了叶下珠中叶下珠素的高效液相色谱法(HPLC)检测方法,同时采用HPLC测定不同产地和不同部位的叶下珠药材中叶下珠素含量;对叶下珠中叶下珠素的提取与分离纯化工艺进行了较深入而系统的研究,确定了工艺流程和分离纯化条件,同时对纯化的叶下珠素单体进行了质谱鉴定。主要研究内容如下:HPLC定量检测叶下珠素的含量。确定液相色谱条件为:色谱柱C18(250mm×4.6mm,5um),检测波长230nm,柱温30℃,进样量20μL,流速0.8mL/min,以甲醇—水(80:20)为流动相等梯度洗脱。在此液相条件下,叶下珠样品液中五种组分得到较好地分离。叶下珠素在2.72μg/mL—136μg/mL浓度范围内线性关系良好。HPLC测定不同产地和(广西,南宁)不同部位叶下珠药材中叶下珠素含量。结果表明,海南产叶下珠中叶下珠素含量最高为0.664%,广西次之(0.565%),广东,湛江为(0.178%),其他产地叶下珠素含量均较低。不同部位以叶中含量最高(1.04%),果实(0.03%)、茎(0.02%)、枝(0.018%)、根(0.01%)中含量都很低。叶下珠中叶下珠素的提取工艺研究。乙醇超声法提取,进行单因素试验和正交试验,确定最佳提取工艺参数。结果表明,影响叶下珠素提取效率的各因素主次顺序是:乙醇浓度>液料比>提取时间,提取温度的影响高度显著。最佳提取工艺参数为:乙醇浓度95%,液料比25,提取时间20min,重复提取两次,叶下珠素含量为0.687%。叶下珠素的纯化工艺研究。比较HPD100、HPD100A、HPD700等七种大孔树脂对叶下珠素的吸附分离特性,确定选择HPD100大孔树脂。较优纯化条件为:上样流速为1BV/h,选择80%乙醇为洗脱溶剂,洗脱流速为2BV/h,洗脱液用量约为9BV,在该条件下叶下珠素纯度从9.47%提高到55.2%通过硅胶柱层析纯化叶下珠素粗产品得到纯度为83%,选择石油醚对叶下珠素粗品进行重结晶得到了纯度为96.79%。对纯化的叶下珠素单体进行了质谱鉴定,结果表明纯化所得晶体与叶下珠素标准品质谱图基本一致。