【摘 要】
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本论文以实验室分离得到的萎缩芽孢杆菌SF1为研究对象,为了探究其拮抗蛋白的功能,对其β-1,3-葡聚糖酶基因进行了克隆和表达。本文的主要研究内容和结果如下:1、β-1,3-葡聚
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本论文以实验室分离得到的萎缩芽孢杆菌SF1为研究对象,为了探究其拮抗蛋白的功能,对其β-1,3-葡聚糖酶基因进行了克隆和表达。本文的主要研究内容和结果如下:1、β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆:从萎缩芽孢杆菌SF1中克隆获得了 β-1,3-葡聚糖酶基因bgl,基因全长1086bp,G+C含量50.4%,编码358个氨基酸,理论的分子量为47 kDa。2、β-1,3-葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达:将克隆得到的β-1,3-葡聚糖酶基因片段与表达载体PGEX-4T-1连接构建重组质粒pGEX-4T-1-bgl,转化宿主菌BL21(DE3),并成功获得工程菌株NDM-1。经SDS-PAGE电泳检测,融合蛋白相对分子量约为73 kDa。3、β-1,3-葡聚糖酶酶活力及抑菌效果的测定:异源表达的β-1,3-葡聚糖酶,抑菌率最高达到45%,是菌株SF1抑菌率的61.9%。
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