菝葜又名金刚藤,其药用部位为百合科植物菝葜Smilax China L.的干燥根茎,收载于2015版《中国药典》一部,具有利湿去浊、祛风除痹,解毒散瘀的功效,用于小便淋浊,带下量多,风湿痹痛,疔疮痈肿等症。目前菝葜临床上主要用于治疗盆腔炎、附件炎、包块等妇科疾病。中药谱效学是在中医药理论现代研究的基础上,以中药指纹图谱为基础,以效应及效应体学为主要内容,应用生物信息学方法,建立中药指纹图谱与中药质量疗效内在关系的一门学科。课题组前期研究确定了菝葜抗炎有效部位群及12个抗炎活性成分。由于菝葜所含成分众多,还有哪些成分具有抗炎活性目前还不清楚。因此,本论文在前期研究基础上,釆用谱效关系研究的思路,以不同产地的菝葜药材乙醇提取物为研究对象,开展化学指纹图谱、生物活性及基于“谱效关系”的有效物质辨识研究,为完善菝葜药材质量评价标准及进一步诠释其抗炎活性的物质基础提供依据。本论文主要完成了以下研究工作:1、菝葜指纹图谱研究收集了全国10个不同产地的菝葜药材,采用UPLC-DAD法建立菝葜指纹图谱。结果显示,10批菝葜药材乙醇提取物的化学成分存在较大差异。从DAD指纹图谱中选取45个峰,在10批菝葜药材中这些峰的峰面积存在明显的差别,表明可以采用这些菝葜药材制备差异提取物进行谱效研究。2、体内抗炎活性研究采用二甲苯致炎小鼠耳肿胀模型观察菝葜差异提取物的抗急性炎症效果,以耳肿胀度及肿胀率为评价指标。结果显示,除来自于河南的样品(S4)外,其他9个样品与模型组比较均能显著降低实验小鼠的耳肿胀率,且抗炎活性存在较大差异。采用机械损伤合并大肠杆菌菌液注入法制备大鼠慢性盆腔炎(CPID)动物模型,观察菝葜差异提取物的抗CPID的效果。以血清中SOD、MDA、IL-6、TNF-α为评价指标。结果显示,不同产地菝葜提取物对各个血清指标的作用不同。3.体外抗炎活性研究采用LPS诱导RAW264.7细胞产生炎症模型,检测IL-6、TNF-α2个炎症因子,对差异提取物进行体外抗炎活性的研究,考察体内外实验结果是否具有一致性,以期为谱效关系研究思路提供参考。结果显示,体内、体外实验对IL-6的作用结果一致;对TNF-α的作用,有7个产地药材体内外实验结果一致。提示进行谱效关系研究时,采用体外实验代替体内实验有一定的可能性,但还需要进行更多对比试验进行验证。4、菝葜抗炎作用谱效关系分析在菝葜指纹图谱和体内抗炎活性药理数据的基础上,采用灰色关联分析方法对菝葜药材差异提取物指纹图谱的化学成分与抗炎药效的关联性进行分析,以峰面积为比较序列,药效指标为参考序列,对45个色谱峰与6个药效指标及总药效进行了相关度分析。分析结果显示,各峰对药效指标的关联度均在0.6以上,表明这些化学成分与菝葜的抗炎作用均有关联,但各成分对药效贡献程度有所差异,其中未知结构的3#峰具有最强的抗炎活性,绿原酸、花旗松素-7-O-葡萄糖苷等也与抗炎活性有很强的关联度。研究结果体现了中药多成分协同及多把点发挥作用的特点。