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丙型肝炎是一种病毒感染性疾病,具有传染性,其病原体为丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV),若不及时治疗,则很容易慢性化,发展为肝硬化甚至是肝癌。HCV感染机体后,经过机体的免疫应答,少部分人(约15%)可自行清除病毒,绝大部分患者则发展为慢性丙型肝炎(Chronic hepatitis C,CHC),引起机体持续性病毒感染状态,导致患者的免疫功能紊乱。因此,除肝脏炎症外,部分患者可同时合并肝外表现,其中包括血清球蛋白升高。但临床观察发现球蛋白升高与肝脏炎症严重程度并不相关,积极有效的抗病毒治疗可以降低球蛋白水平,提示高球蛋白血症可能与HCV感染引起的免疫失调有关。血清球蛋白升高可能是B淋巴细胞的异常分化及增殖的结果。CD4+T细胞是辅助B淋巴细胞产生抗体的主要细胞,其功能的正常发挥是决定B淋巴细胞产生抗体水平的关键因素。最新研究发现滤泡辅助性T淋巴细胞(Follicular helper T cell,Tfh)是定位于淋巴滤泡的CD4+T细胞亚群,参与辅助B淋巴细胞的活化、生发中心(Germinal center,GC)的形成以及高亲和力抗体的产生。HCV感染过程中,Tfh细胞功能状态的改变涉及多种调节机制,其中转录因子调控网络是最主要的调节机制。既往研究认为,B淋巴细胞淋巴瘤因子6(B-cell lymphoma 6,Bcl-6)是主要参与Tfh细胞分化发育的主要转录因子,但最新研究表明无刚毛鳞甲复合体样蛋白(Achaete-scute homologue 2,Ascl2)可能在Bcl-6之前参与启动Tfh细胞的分化发育,在其过程中或将起到更为重要的作用。本研究主要探讨CHC患者Tfh细胞中Ascl2的表达变化及其与血清球蛋白的关系。目的1.检测CHC患者和健康志愿者外周血中CD4+T细胞表面分子表达变化;2.分析Tfh细胞与血清球蛋白水平之间的相关性;3.探讨外周血Tfh细胞转录因子Ascl2的表达在慢性HCV感染过程中的作用。方法共选取2015年10月-2016年5月我院住院及门诊初治CHC患者46例,另取健康人外周血32例作为健康对照组。应用流式细胞技术分析外周血中CD4+T淋巴细胞各亚群表面分子表达情况;ELISA方法检测血浆细胞因子IL-2、IL-12水平;实时定量PCR法检测Tfh细胞中Ascl2 mRNA表达水平;应用全自动生物化学分析仪检测肝功,分析检测各指标变化与HCV感染的相关性。采用独立样本t检验的统计学方法进行组间比较,两组以上比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),相关性分析本研究则采用Person相关分析。结果CHC患者外周血Tfh细胞与B淋巴细胞呈正相关(r=0.5823,P=0.0112),外周血B淋巴细胞与球蛋白呈正相关(r=0.4509,P=0.0316),Tfh细胞与血清球蛋白呈正相关(r=0.5835,P=0.0383);CHC患者外周血Tfh细胞中Ascl2 mRNA的表达显著高于健康对照组(t=4.5522,P=0.0019),Ascl2 mRNA的表达与血清球蛋白呈正相关(r=0.5788,P=0.0301)。