禽蛋膜中角蛋白的提取及其分析

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本文研究了碱法(NaOH)、氧化法(H2O2)、酶法(碱性蛋白酶)三种提取方法分别从鸡蛋膜中提取角蛋白及特性,从反应原理、提取率、分子量、结构完整性等方面展开,并对三种方法的水解过程、提取效果以及角蛋白表征特性进行了探讨。1、以鸡蛋壳膜为原材料,分别采用碱法(NaOH)、氧化法(H2O2)、酶法(碱性蛋白酶)等三种已有研究报道的最佳提取方法,制备了三种不同方法所提取的角蛋白。2、分别对三种方法得到的角蛋白提取率、反应速率、分子量、结构等多个方面进行了研究,结果如下:提取率方面,氧化法(24.33%)>碱法(19.31%)>酶法(15.19%);反应速率方面,碱法最快,氧化法次之,酶法最慢;角蛋白分子量方面;酶法(碱性蛋白酶,31~43kDa)>碱法(NaOH,14.4~20.1kDa)>氧化法(H202,<14.4kDa);三种方法得到的分子量均分布集中,表明制备的产品纯度较高;角蛋白结构方面:酶法和碱法提取的角蛋白,二级结构保存完整,氧化法提取的角蛋白二级结构受到了破坏。3、文章最后探讨了三种方法提取角蛋白优劣以及在实际生产中的运用。在角蛋白高分子量和结构完好性方面,酶法和碱法明显优于氧化法,但是在小分子多肽类角蛋白或者氨基酸产品时,我们选取氧化法就会有很好的提取率;同时,如果在实际生产中对时间有要求,我们可以采用复合法,即先用碱法处理,疏松角蛋白分子结构,然后再以还原法或酶法提取,这样很好的解决了单独提取提取时间长的问题。当然,在小分子角蛋白氨基酸或多肽的实际生产中,我们也可以先用碱法处理,再用酶法提取,这样就很好的减少了酶的添加量。
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