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脑出血（Intracerebral hemorrhage,ICH）是神经科的常见病之一,脑出血后继发的脑水肿是患者致死致残的重要原因。脑出血后脑水肿的原因尚不十分明确,文献报道ICH后血肿释放的凝血酶、血红蛋白等物质参与了脑水肿的形成。临床观察发现,ICH后24小时左右出现的脑水肿与红细胞释放的血红蛋白有关。另有报道血红蛋白在血红素氧合酶-1（Heme oxygenase-1,HO-1）作用下所产生的降解产物血红素、胆红素和亚铁离子是造成脑水肿的因素之一。上述血红蛋白降解产物致脑水肿的程度及HO-1的抑制剂能否减轻脑水肿成为近年来研究的热点,但有关HO-1的抑制剂锡原卟啉对此影响的研究报道较少。本实验采用立体定向注射的方法,分别向大鼠尾状核注入血红蛋白、血红素、胆红素及FeCl2,来观察它们对脑水肿的影响程度;同时观察HO-1特异性的拮抗剂锡原卟啉（Sn-protorporphyrin,SnPP）抑制HO-1后能否减轻脑水肿。通过脑含水量的变化和伊文斯兰含量的变化评价脑水肿程度和血脑屏障破坏程度;采用组织切片观察脑组织病理变化;应用免疫组化技术观察HO-1的表达来间接判断组织氧化损伤程度,从而为阐明血红蛋白致脑水肿的作用机制及HO-1抑制剂用于临床治疗脑出血后脑水肿提供理论依据。材料与方法健康SD大鼠90只,雌雄不拘,共分为9组。实验分两个部分进行:第一部分探讨血红蛋白被HO-1降解后的三种产物血红素、胆红素及亚铁离子对脑水肿影响程度的差异。第二部分探讨HO-1抑制剂锡原卟啉能否通过抑制血红蛋白的降解来减轻脑水肿。郑州大学2004届硕士毕业论文锡原叶琳对血红蛋白降解产物所致脑水肿的影响第一部分:取50只大鼠随机分成5组。A,生理盐水组;B,血红素组;C,胆红素组;D,亚铁离子组;E,血红蛋白组。采取立体定向注射方法,利用微量注射器分别向A、B、C、D、E组大鼠右侧尾状核注入50时:生理盐水、血红素、胆红素、FeC12和血红蛋白。其中,血脑屏障通透性观察的大鼠在注射完毕后,自舌静脉给予浓度为2.5%的伊文斯兰溶液（0 .2ml/1009）。1.标本采集:大鼠于术后第24h,断头处死,取右侧大脑半球,以针道为中心,距针道前后各1.Slnln处冠状切取两块脑组织。2.检测指标:（1）脑水含量和伊文斯兰含量测定（2） HE染色3.统计处理:应用SPSSIO.0统计软件进行数据处理,统计方法采用单因素方差分析与秩和检验并进行两两比较,以a=0 .05作为检验水准。第二部分:取40只大鼠,随机分为4组。F,生理盐水组;G,血红蛋白组;H,生理盐水加锡原叶琳组;工,锡原叶琳加血红蛋白组,每组10只,采取立体定向注射方法,分别向F、G、H、I组大鼠右侧尾状核注入50风:生理盐水、血红蛋白、锡原叶琳十生理盐水、锡原叶琳+血红蛋白。（锡原叶琳用量为90nmol）1.标本采集:同第一部分。2.检测指标:（1）脑水含量和伊文斯兰含量测定（2） HE染色（3）免疫组化SABC法检测HO一1阳性表达细胞数。3.统计处理:同第一部分。结果1.脑水含量测定:E组脑水含量显著高于A组（P<0.ol）;B,C,D三组高于A组,差异均具有显著性（P<0.05）;D组分别与B,C组比较,差异具有显著性（火0.05）。说明血红蛋白及其三种降解产物均可导致脑水肿;亚铁离子的致脑水肿作用最强。H组脑水含量与F组差异无显著性（外0.05）;G组高于I组;工组高于F组,差异具有显著性护<0.05)。说明锡原叶琳本身并没有导致脑水肿的作用;锡原叶琳可减轻血红蛋白所致的脑水肿,但其抑制作用是不完全的。3.伊文斯兰含量测定:E组伊文斯兰含量显著高于A组（火0.01）;B,C,D三组均高于A组,差异均具有显著性（P<0.05）;D组高于B,C组,差异具有显著性（P<0.05）。说郑州大学2004届硕士毕业论文锡原叶琳对血红蛋白降解产物所致脑水肿的影响明注入血红蛋白及其三种降解产物均可造成血脑屏障通透性的增加;亚铁离子导致的血脑屏障通透性增加的程度大于血红素和胆红素。H组伊文斯兰含量与F组的差异无显著性（乃0.05）;G组高于I组,工组高于F组,差异具有显著性（P<0.05）;说明单一注入锡原叶琳不影响血脑屏障通透性;锡原叶琳可以减轻血红蛋白导致的血脑屏障通透性的增高,但其作用是不完全的。2.HE染色观察:B、C、D组均可见脑组织破坏,组织结构紊乱,神经细胞水肿,碎裂。A组、F组和H组脑组织结构正常,E组和G组脑组织破坏较为明显,组织结构紊乱,神经细胞高度水肿碎裂,细胞核固缩,正常神经细胞少见。工组脑组织水肿较轻微,程度明显较G组为轻,尚可见大部分存活的神经细胞。3.HO一1阳性细胞数的变化:F组与H组未见HO一1阳性表达;G组阳性细胞数高于F组（P<0.05）;I组与G组之间差异有显著性,（入0.05）;I组高于F组,差异有显著性（入0.05）。说明锡原叶琳本身并不能诱导HO一1表达;注入血红蛋白能诱导HO一1表达;锡原叶琳能抑制血红蛋白所诱导的HO一1表达。结论1.血红素氧合酶一1降解血红蛋白所产生的三种降解产物中,亚铁离子导致的脑水肿程度较为严重,而血红素,胆红素导致的脑水肿程度相对较弱。2.血红素氧合酶特异性抑制剂锡原叶琳（SnPP）对脑出血后脑水肿的产生有抑制作用。3.锡原叶琳对血红蛋白所致脑水肿的抑制作用是不完全的,这可能与锡原叶琳对血红蛋白降解的抑制作用具有剂量依赖性及脑?