富钒决明子对淋巴性脑水肿大鼠海马神经元的保护作用

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目的应用富钒决明子以普通决明子及无机钒(NaVO3)为对照,干预淋巴性脑水肿(lymphatic brain edema, LBE)大鼠,以评价富钒决明子对于淋巴性脑水肿大鼠海马神经元的保护作用,并探讨其可能机制;比较普通决明子、无机钒(NaVO3)与富钒决明子之间对于LBE大鼠海马神经元保护作用的差别。方法将大鼠随机分为5组:Sham组、LBE组、SC组、V组和V+SC组(n=10),Sham组、LBE组、V组均以普通大鼠饲料喂养,SC组、V+SC组分别应用普通决明子及富钒决明子大鼠饲料干预。Sham组行假手术,其余各组进行LBE手术。V组手术前后腹腔注射无机钒(NaV03)。应用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力、尼氏染色检测大鼠海马CA1区椎体细胞层神经元功能状态、ChAT免疫组化染色和RT-PCR检测大鼠海马胆碱能神经元细胞活性,TUNEL染色检测大鼠海马CA1区椎体细胞层神经元凋亡。结果(1)各组大鼠每日进食饲料重量(60g/只/d)和每周体重增长重量(20g/w)无差异(P>0.05);SC组与V+SC组大鼠每日饮水50ml,较Sham组(40m1/d)多(P<0.05)。(2)MWM定位航行试验中,V+SC组大鼠逃避潜伏期与Sham组大致相同,SC组、V组依次延长,LBE组大鼠逃避潜伏期最长,且始终高于其他组。(3)M WM空间搜索试验中,V+SC组大鼠与Sham组穿越平台次数、目标象限活动时间和目标象限路程/总路程三个指标均相近(P>0.05)。V+SC组、V组三个指标均明显高于LBE组(P<0.0]);SC组与LBE组无差异(P=0.131)。V+SC组明显高于V组(P<0.01)。(4)LBE组、V+SC组、V组、SC组、LBE组尼氏染色海马CA1区椎体细胞层神经元细胞深蓝、紫色区域的累积光密度(integrated optical density,IOD)值依次降低,各处理组与Sham组间以及各处理组间IOD值均有显著差异(P<0.01)。(5)LBE组、V+SC组、V组、SC组、LBE组ChAT免疫组化染色海马CA1区椎体细胞层神经元细胞黄色棕黄色区域IOD值依次降低,各处理组与Sham组间以及各处理组间IOD值均有显著差异(P<0.01)。(6)TUNEL染色海马CA1区椎体细胞层神经元细胞凋亡率,V+SC组与Sham组间无差别(P=0.338),其余各处理组与Sham组间以及各处理组间均有显著差异(P<0.01)。(7) RT-PCR中,ChAT表达量LBE组、V+SC组、V组、SC组、LBE组依次降低,各处理组与Sham组间以及各处理组间ChAT与β-actin灰度值之比均有显著差异(P<0.01)。结论(1)富钒决明子饲养的大鼠,其正常生长发育未受影响。(2)富钒决明子可以改善LBE大鼠的空间学习记忆能力,其可能机制是通过增加海马CA1区锥体细胞层神经元数目、提高胆碱神经元功能、抑制神经元凋亡。为LBE的治疗提供实验依据。(3)富钒决明子的神经保护作用优于普通决明子以及无机钒(NaVO3)。
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