论文部分内容阅读
研究背景： 益气活血方宁心痛颗粒是临床治疗冠心病不稳定性心绞痛的有效中药制剂，可抑制易损斑块内炎症因子的表达，减轻炎症反应，稳定斑块。巨噬细胞通过SRs摄取oxLDL，是形成泡沫细胞的关键，泡沫细胞聚集形成大块的脂肪最终导致粥样斑块易损性增加。巨噬细胞是动脉粥样硬化及易损斑块形成的重要靶细胞，宁心痛颗粒在细胞水平稳定斑块的作用机制尚有待深入研究。 目的： 观察宁心痛颗粒对THP-1源性巨噬细胞摄取oxLDL形成泡沫细胞过程中关键的SRs(SRA/CD36/ABCA1)表达情况的影响，进一步探讨其干预动脉粥样硬化斑块易损性的机制。 方法： THP-1细胞经160nM的PMA诱导分化成巨噬细胞，按以下分组:①空白组，即巨噬细胞组;②对照组，即泡沫细胞组，由巨噬细胞加oxLDL而形成;③宁心痛颗粒有效组分及含药血清干预组:分别给予APS、LIG、APS+LIG、宁心痛颗粒含药血清加oxLDL（含药血清组另设空白血清作对照）;④阳性对照组:α-toc加oxLDL;⑤阴性对照组:DXM加oxLDL。用油红O染色观察巨噬细胞泡沫化细胞内脂质的变化，酶法及高效液相色谱法检测泡沫细胞生成率，WB法检测SRs（SRA/CD36/ABCA1）及其通路中关键蛋白LXRα/PPARγ的表达情况。 用PPARγshRNA Plasmid抑制THP-1源性巨噬细胞PPARγ的表达，分别给予APS、LIG、APS+LIG、宁心痛颗粒含药血清加oxLDL，再用上述实验方法检测巨噬细胞泡沫化的改变。 结果： 1、宁心痛颗粒益气作用的组分黄芪多糖较对照组能明显下调巨噬细胞CD36，上调ABCA1、PPARγ(P＜0.05)，抑制巨噬细胞对oxLDL的净摄入，减少泡沫化。 2、宁心痛颗粒活血作用的组分藁本内酯较对照组能明显下调巨噬细胞CD36，上调ABCA1、PPARγ(P＜0.05)，抑制巨噬细胞对oxLDL的净摄入，减少泡沫化。 3、黄芪多糖合藁本内酯较对照组能明显下调巨噬细胞SRA、 CD36，上调ABCA1、PPARγ(P＜0.05)，抑制巨噬细胞对oxLDL的净摄入，减少泡沫化。 4、宁心痛颗粒含药血清较对照组能明显下调巨噬细胞SRA、 CD36，上调ABCA1、PPARγ(P＜0.05)，抑制巨噬细胞对oxLDL的净摄入，减少泡沫化。 5、黄芪多糖、藁本内酯、黄芪多糖合藁本内酯、宁心痛颗粒含药血清对巨噬细胞SRA、 CD36表达的抑制强度由高至低为:宁心痛颗粒含药血清、黄芪多糖合藁本内酯、黄芪多糖、藁本内酯，与对ABCA1、PPARγ的上调强度由高至低排序一致。 6、siRNA抑制THP-1源性巨噬细胞PPARγ的表达后，各组药物抑制巨噬细胞泡沫化的能力均明显下降，但宁心痛颗粒含药血清仍有一定的抑制作用。 结论： 1、益气活血方宁心痛颗粒益气、活血的有效组分黄芪多糖、藁本内酯以及含药血清均能通过调节脂质体的表达，抑制巨噬细胞对oxLDL的净摄入，减少泡沫化。 2、益气活血方宁心痛颗粒抑制巨噬细胞泡沫化的作用部分通过PPARγ途径。 3、益气活血复方抑制巨噬细胞泡沫化，进而有可能稳定斑块的效应优于单一的益气或活血。