稻谷储藏后的品质不仅取决于储藏环境和技术,更取决于储藏前的品质,这是由基因决定的。实验室前期研究发现类受体蛋白激酶FERONIA(FER)同源基因FLR1参与调控水稻淀粉合成并影响种子大小以及淀粉结构。本研究进一步比较FER野生型和突变株种子在人工老化试验条件下的发芽率,初步发现FER蛋白表达正向调控种子储藏性能。在此基础上,探寻水稻FLR1互作蛋白,并在大肠杆菌中表达重组FLR1蛋白,用纯化蛋白免疫大鼠,获得FLR1特异抗血清,为后续研究奠定基础。主要结果如下:(1)人工老化3-9天后,拟南芥FER基因突变后的fer4种子发芽率显著低于野生型种子老化后的发芽率。水稻FER同源基因FLR1过表达植株种子老化前发芽势和发芽率均低于野生型的,经过20天人工老化后,其发芽势和发芽率高于野生型的。说明FER/FLR1基因产物正向调控种子耐储性。(2)通过酵母双杂交文库筛选,得到了28个水稻FLR1结合蛋白,并通过体外实验证实了 7个蛋白与FLR1有互作。(3)为了获得FLR1抗体用于后续功能分析,将FLR1的N端和C端分别构建到表达载体pET-32a、pGEX-4T-1、pET-22b和pTriEx-4上,比较重组蛋白在不同条件下的表达效果。结果显示:FLR1-BW在pET-32a及pGEX-4T-1中能够有效表达,最优条件为16 ℃/16 h和0.5 mmol/L IPTG。而FLR1-BN蛋白表达后会对大肠杆菌产生细胞毒性,但在293细胞中能够表达。用纯化的FLR1-BW蛋白免疫大鼠得到了FLR1抗血清。该抗血清特异性识别纯化的FLR1并且在水稻的根茎叶组织中检测到一个130kD蛋白,其大小与FLR1理论分子量接近。结论:Feronia及其水稻同源基因FLR1正向调控种子的耐储性能。其可能的机制是通过与其它蛋白相互作用调控耐储基因的表达。进一步研究FLR1及其互作蛋白的功能,将有助于揭开稻谷储藏的分子机制,助力粮食安全。