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目的:抑郁症一直是全球面临的具有复杂病因的精神疾病问题,给许多国家带来了沉重的医疗和经济负担。据世界卫生组织统计,每年近80万人死于抑郁症,约85%抑郁症患者未获得治疗。近几年,我国抑郁症患者明显增加,抑郁症治疗问题亟待解决。大量研究表明,肠道菌群通过肠-脑轴对大脑产生影响,是抑郁症治疗的新途径。实验通过慢性不可预见性应激刺激(Chronic Unpredictable Mild Stress)建立肝郁脾虚抑郁小鼠模型,对小鼠大脑皮层转录组和肠道菌群宏基因组分别进行检测,基于肠-脑轴探究四磨汤抗抑郁的作用机制,为四磨汤广泛应用于临床提供依据。方法:70只KM小鼠,适应一周后,随机分为空白组、模型组、氟西汀组、四磨汤中剂量组、四磨汤高剂量组。除空白组外其余各组进行3周的CUMS造模,采用造模与灌胃同时进行的方式,分别选用糖水偏好实验、悬尾实验、游泳实验、旷场实验,检测各组的行为学变化。造模结束后取小鼠大脑皮层进行转录组测序和粪便宏基因组测序,选取具有差异性的基因和肠道菌群。结果:经3周造模后模型组与空白组相比糖水偏好明显降低,差异显著(P<0.05),悬尾不动时间显著增加(P<0.05),游泳不动时间显著增加(P<0.05),穿越中央格显著减少(P<0.01)。四磨汤组与模型组比较糖水偏好无显著差异(P>0.05),悬尾不动时间显著降低(P<0.05),强迫游泳不动时间无显著差异(P>0.05),穿越中央格次数显著增加(P<0.05)。基于转录组测序技术研究四磨汤对抑郁症小鼠大脑基因表达的影响,通过Differentially Expressed Genes(DEG)分析发现,C_DNvsM_DN中,显著上调、下调差异表达基因分别是128个和133个;F_DNvsM_DN中,显著上调、下调差异表达基因分别是116个和66个;S-H_DNvsM_DN中,显著上调、下调差异表达基因分别是100个和147个,多数基因与抑郁症、阿尔兹海默症、精神分裂症、癫痫等精神疾病有关。通过Gene Ontology(GO)富集分析发现,各对样品存在显著性富集,主要在神经元凋亡过程的调控、免疫反应、胶质细胞发育。Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)富集分析发现,四磨汤组主要通路有RAS、MAPK、PI3K-Akt、神经营养因子、RNA降解、剪接体、神经活性受体配体相互作用、破骨细胞分化、花生四希酸代谢。其中,MAPK、PI3K-Akt、神经营养因子、花生四希酸代谢是抑郁症的重要通路。基于宏基因测序技术研究四磨汤对抑郁症小鼠肠道菌群的影响,通过对菌群丰度分析发现,模型组中厚壁菌门(Firmicutes)、梭菌目(Clostridiales)、弯曲菌目(Campylobacterales)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)、螺杆菌科(Helicobacteraceae)、乳杆菌属(Lactobacillus)明显降低,拟杆菌属(Bacteroides)明显升高,并且对ATP转运酶、转录调控因子、组氨酸激酶丰度有明显升高作用,糖苷水解酶丰度明显降低作用。四磨汤组中厚壁菌门(Firmicutes)、梭菌目(Clostridiales)、弯曲菌目(Campylobacterales)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)、螺杆菌科(Helicobacteraceae)、乳杆菌属(Lactobacillus)明显升高,拟杆菌属(Bacteroides)明显降低,ATP转运酶、转录调控因子、组氨酸激酶丰度明显降低,糖苷水解酶丰度明显升高。结论:模型小鼠糖水偏好度明显降低且具有肝郁脾虚的特征表现说明小鼠造模成功,根据行为学结果来看氟西汀、四磨汤均明显改善小鼠抑郁样行为,提示四磨汤对肝郁脾虚型抑郁症有较好的抑制作用。依据转录组和宏基因组分析结果,推测四磨汤调节拟杆菌和乳杆菌的丰富通过肠-脑轴影响脑部PI3K-Akt、MAPK、神经营养素、花生四烯酸代谢这些通路的活性发挥抗抑郁作用。