大黄、关黄柏部位精制及双柏散五种精制部位成膜性的研究

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双柏散是广泛应用于外科、骨伤科的经验方,由大黄、侧柏叶、关黄柏、泽兰、薄荷五味药材组成,具有活血化瘀、清热解毒、消肿止痛之功效。双柏散在临床应用的过程中存在工艺落后、浪费药材、使用不便、易弄脏衣服等缺点。本研究对双柏散方中大黄、关黄柏的有效成分进行了精制,对各种成膜材料进行筛选,为将其开发成为中药外用喷膜剂提供科学依据。目的:优化双柏散处方中大黄、关黄柏的精制工艺,以及成膜工艺的研究。为将其开发为疗效确切、使用方便的中药外用喷膜剂奠定基础。方法:(1)以芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量为指标,优选大黄最佳的提取工艺,采用D301型大孔树脂对其进行纯化,对上柱液不同pH值、上柱液浓度、上柱液泄漏率、洗脱液pH及其用量进行考察。(2)以盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量为指标,优选关黄柏最佳的提取工艺,采用AB-8型大孔树脂对其生物碱进行纯化,对上柱液浓度、洗脱液用量进行考察。(3)采用聚乙烯醇(PVA),甲壳素,卡波姆,聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、壳聚糖、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)等进行成膜实验,以粘度、喷射实验、流失性、成膜时间等为评价指标,对成膜材料进行初筛。(4)采用生物显微镜对各供试品成膜后表面形态进行观察,探讨双柏散五种精制部位(大黄葸醌类、侧柏叶黄酮类、关黄柏生物碱类、泽兰黄酮剂酚酸类、薄荷挥发油)对各成膜材料成膜性的影响,筛选喷膜剂的最佳成膜材料。结果:(1)优化大黄最佳提取纯化工艺为:5倍量的95%乙醇提取3次,每次1小时,五种游离蒽醌的转移率达98.34%,大黄上柱液浓度以0. 1g·mL-1、pH值以11的转移率达到近90%,洗脱液以约20倍量的含0.25mol·L-1 HCL的75%乙醇为佳,最终五种游离蒽醌的转移率达到75%左右。(2)优化关黄柏最佳提取纯化工艺为:8倍量75%的乙醇回流提取3次,每次1小时,生物碱的转移率可达83.75%;关黄柏上柱液(调pH8并离心)浓度为0.1g·mL-1的转移率达到80%左右;洗脱液中生物碱的转移率达到75.14%。(3)壳聚糖与甲壳素在常温或加热的情况下在水中或者乙醇中均较难溶解;卡波姆先用水浸泡过夜,溶解后呈凝胶状不易喷出,极易堵塞喷头;羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶解性较好,但不能成膜,因此均不适合作为喷膜剂的成膜材料。聚乙烯吡咯烷酮(PVP)系列具有较好的成膜性,且与其分子量呈正比的关系,PVP K15、K17、K25因分子量较PVP K30小,在达到相同的成膜效果情况下,PVP K15、K17、K25的用量较PVP K30多,而K90分子量过大,溶解后不易喷出,且喷出后流失性大,从节约成本考虑,选择PVP K30,且成膜实验表明,当浓度在6%-10%时,其均有较好的成膜性;聚乙烯醇(PVA)系列均有较好的成膜性,但浓度较高时喷射实验呈线状,因此选择它们喷射实验未成线状的临界浓度,PVA-124选择1.2%,PVA-1788为1.6%,(PVA)-1788低粘度型为2.4%。(4) PVA-124, PVA-1788, PVA-1788低粘度型和PVPK30成膜材料对侧柏叶精制部位、关黄柏精制部位、泽兰精制部位、薄荷挥发油成膜效果较好,但与大黄精制部位及五种精制部位混合物制成的喷膜剂溶液浑浊,成膜后均有较为明显的沉淀析出,PVP K30所成的膜透明,质地致密,膜的表面上未见任何颗粒状的沉淀析出,且PVP K30易溶于水和乙醇,溶解时无需加热,操作方便,是理想的成膜材料。结论:确定大黄、关黄柏的精制方法,初步研究各种成膜材料的成膜性能,首次对双柏散五种精制部位与成膜材料之间成膜性的共性技术进行研究,确定PVP K30作为喷膜剂的最佳成膜材料,为双柏散研究开发奠定基础。
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