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研究目的1.研究γ-干扰素对小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞吞噬、杀伤阿萨希毛孢子菌的作用。2. γ-干扰素对小鼠巨噬细胞株RAW264.7体外抗阿萨希毛孢子菌杀伤机制的影响。研究方法1.不同浓度的γ-干扰素(IFN-γ)与RAW264.7细胞共孵育18h后,分别与阿萨希毛孢子菌(T.asahii)临床株705共培养45min、4h。45min后在倒置显微镜下观察瑞氏-姬姆萨染色RAW264.7细胞吞噬T.asahii的情况。4h后检测RAW264.7细胞的杀伤活性。2.不同浓度(10U/ml、100U/ml、1000U/ml)的IFN-γ与RAW264.7共同培养,再加入T.asahii培养后检测菌落形成单位(CFU/ml),计算各浓度组的生长抑制率。在上述体系的上清液中分别检测亚硝酸根离子(NO2-)。将巨噬细胞(Macrophage,Mφ)与不同终浓度的IFN-γ共同孵育后分别检测超氧阴离子(O2-)的OD值。结果1. IFN-γ呈剂量依赖性地增强RAW264.7细胞吞噬、杀伤T. asahii的活性,各组之间的差异具有显著性意义(P<0.01)。2. IFN-γ浓度分别为10U/ml、100U/ml、1000U/ml时,T.asahii的生长抑制率分别为25.21%、41.95%、55.83%,组间差异具有显著统计学意义(P<0.01)。上清液中NO2-的浓度分别为89.16±3.32、108.07±3.81、126.44±3.52,与空白对照组(74.47±1.48)相比差异具有显著性意义(P<0.01)。上清液中O2-的OD值分别为0.317±0.006、0.424±0.006、0.518±0.006,与对照组相比差异具有显著性意义(P<0.01)。结论1.IFN-γ可增强RAW264.7细胞对T.asahii的吞噬、杀伤作用。2.随着IFN-γ浓度的增加,T.asahii生长抑制率增加。IFN-γ通过产生一氧化氮(NO)及O2-增强巨噬细胞体外抗T.asahii的杀伤活性。