第一部分：5hmc在脑缺血损伤后的表达　　目的：5hmc是继5mc后表观遗传的另一重要标志，是5mc在Tet酶的作用下催化而来，广泛存在于哺乳动物的 DNA中。5hmc的高表达不仅表现在中枢神经系统，还在其他组织器官中，如肝脏和肾脏等。在本研究中，我们将观察在小鼠缺血再灌注模型中，5hmc在缺血再灌注损伤后的表达变化。　　方法：将SPF级雄性ICR小鼠随机分为两组，分别为假手术（Sham）组和缺血再灌注（I/R）组。建立小鼠MCAO模型，让小鼠缺血45分钟后，在不同再灌注时间点取损伤部位的脑组织作为样本，采用Dot blot方法检测不同时间点缺血脑组织中5mc和5hmc表达的改变。　　结果：与假手术组相比，I/R组中5hmc的表达在缺血再灌注24小时开始增加，缺血再灌注36小时明显增加，随着时间的延长，48小时时增加最明显，达到高峰（p<0.05），而与对照组相比，5mc在缺血再灌注后36小时明显增加（p<0.05），随着时间延长，5mc的表达逐渐下降。　　结论：脑缺血再灌注损伤后，5hmc和5mc的表达改变，可能参与脑缺血再灌注损伤的病理过程。　　第二部分：5hmc参与脑缺血损伤线粒体基因表达的改变　　目的：众所周知，线粒体损伤是脑缺血损伤的一个重要的病理机制，而脑缺血损伤又加重线粒体损伤。5hmc不仅存在于组织器官中，还在细胞器线粒体中表达。在本研究中，我们将观察在缺血再灌损伤中，5hmc在线粒体中表达变化，及其对线粒体基因表达的影响。　　方法：将SPF级雄性ICR小鼠随机分为假手术（Sham）组、缺血再灌注（I/R）组。建立小鼠 MCAO模型，让小鼠缺血45分钟后，在不同再灌注时间点取缺血再灌注损伤部位的脑组织作为样本，采用Dot blot方法检测不同时间点缺血脑组织中5hmc和5mc表达的改变；在再灌注24小时取缺血损伤部位的脑组织作为样本，分别采用PCR和Western blot的方法检测将5mc催化为5hmc的Tet2mRAN和蛋白水平的改变；qPCR方法检测线粒体DNA亚基mRNA水平的改变。　　结果：与假手术组相比，I/R组中线粒体5hmc的表达在缺血再灌注24小时明显增加，随着时间的延长，5hmc的表达轻微下降，仍明显高于假手术组（p<0.05）,而5mc在缺血再灌注中没有明显改变；将5mc催化成5hmc的Tet2 mRNA和蛋白水平在缺血再灌注24小时都明显增加（p<0.05）；缺血后再灌注24小时，相对于Sham组，I/R组ND2, ND4L, ND5, ND6, COXIII的mRNA明显增加（p<0.05），而COXI、COXII、ATP6、ATP8、Cytb、ND1、ND3和ND4的mRNA水平未发生明显改变。　　结论：小鼠I/R模型中，线粒体中5hmc的表达增加，线粒体DNA亚基表达明显增加，进而影响线粒体的功能。这些结果提示5hmc可能参与脑缺血损伤线粒体基因的改变进而影响线粒体功能。