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本文利用反转录PCR（RT-PCR）和套式PCR（nPCR）技术，对流行于国内部分地区的9株猪瘟病毒（CSFV）E2基因进行克隆，并对其核苷酸及氨基酸序列的同源性进行比较及分析，绘制了系统关系发生树，以期了解近期猪瘟流行野毒主要保护性抗原E2基因的变异情况，为猪瘟的防制提供分子流行病学方面的资料。同时以1株（陕西周至株）为材料，在昆虫细胞中进行表达，为新型猪瘟基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。（1）采用RT-PCR和nPCR扩增出9株国内近期猪瘟流行野毒株的E2基因，将其分别克隆于pMD18-T载体并进行核苷酸序列测定，根据C-株，Brescia株，Alfort株及Shime株确定起始氨基酸三联体的正确位置后进行氨基酸序列推导，并进行了同源性比较，绘制了系统关系发生树。结果表明,所测9株CSFV E2基因的长度均为1324 bp，编码的氨基酸序列均包括完整信号肽序列和跨膜序列，共由442个氨基酸残基组成。可将13株(包括4株参考毒株)CSFV 分为两个组群，GXGL ，GXNN，LNAS，SDJN 4株毒株与C 株，Shimen株， Alfort株和 Brescia株同为一个群组，其E2基因间的核苷酸序列同源性为94.0%～99.4%，所推导氨基酸序列同源性为93.7%～99.5%。HNLS ，SXZZ ，HNCA ，HNXY和 HNDX 5株同为另一群组，之间核苷酸序列同源性为81.9%～99.7%，所推导氨基酸序列同源性为88.2%～99.1%。13株E2基因间的核苷酸序列同源性为81.9%～99.7%，所推导氨基酸序列同源性为88.2%～99.5%，其中 9株流行野毒与4株参考毒株之间核苷酸序列同源性为81．9%～98.9%，所推导氨基酸序列同源性为88.2%～99.5%。说明近期流行毒株的变异呈现一定的多样性。通过对主要抗原区域氨基酸位点变异进行分析，发现各毒株间抗原决定簇未发生明显的变异。（2）对已知的E2基因进行分析后，用聚合酶链式反应（PCR）从陕西周至株克隆化E2全基因中扩增出除去3’端跨膜区的特异性片段（1 033 bp），并在其两端引入BamH I和Hind III酶切位点，将其亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTb，获得重组质粒 pFBHT-E2，转化进含穿梭载体Bacmid 的感受态细胞DH10Bac，得到含E2基因的重组载体质粒rBacmid-E2，以脂质体介导的方法将此重组载体质粒转染 sf9昆虫细胞，经SDS-PAGE和Western-blotting及ELASA等方法检测，结果表明，此E2基因在昆虫细胞中正确表达，表达的蛋白能与猪瘟阳性血清发生特异性反应。