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目的探究使用2,4-二硝基氟苯建立特应性皮炎BABL/c小鼠模型的可行性,检测并分析小鼠背部皮损区皮肤表皮分化复合体相关蛋白S100A7蛋白、兜甲蛋白、内披蛋白的表达,探讨表皮分化复合体内部相关性及其对AD发病的影响,为明确AD动物模型的可行性以及表皮屏障功能障碍与AD发病的关系提供进一步研究方向。方法本实验选取6-8周龄SPF级BALB/c小鼠40只,均为雌性纯系,体重为16-20g,随机分为AD组与正常对照组,每组20只。实验开始前7天对两组小鼠背部给予脱毛,采用8%硫化钠淀粉溶液,脱毛面积约8cm2。AD组建模:实验第1天将0.5%DNFB溶液(溶剂:丙酮:橄榄油3:1)涂抹于AD组小鼠背部脱毛区,涂抹剂量为100μL,第2至6天对AD组小鼠背部不作处理。实验第7天,在相同背部皮肤区域涂抹70μL0.5%DNFB溶液(溶剂:丙酮:橄榄油3:1),此后每周按此剂量涂抹两次左右,共10次。正常对照组建模:每次涂抹剂量、时间同AD组,在脱毛区涂抹丙酮/橄榄油溶液,比例3:1,但此溶液不含DNFB。第35天建模结束,观察两组小鼠10分钟内搔抓次数,并按照皮损区炎症程度评分表进行评估。乙醚麻醉小鼠,摘除右眼球取血,离心取上清液并冻存于-80℃冰箱待用。记录两组小鼠体重及脾脏重量。取背部皮损区皮肤,用于制作病理标本及目的蛋白检测。用ELISA法检测两组血清总IgE及IL-4的浓度,用Western blot法检测两组小鼠皮肤中表皮分化复合体相关蛋白S100A7、兜甲蛋白、内披蛋白表达情况,用HE染色进行组织病理学观察。结果1.小鼠皮肤炎症程度评分:AD组皮肤炎症程度评分(9.00)高于正常对照组(0.00),差异有统计学意义(P<0.05)。2.脾指数与搔抓次数结果:AD组脾指数(2.12±0.27)高于正常对照组(1.77±0.16),AD组搔抓次数(13.55± 1.71)高于正常对照组(1.13±0.86),差异均具有统计学意义(P<0.05)。3.组织病理检测结果:正常对照组小鼠背部皮肤无损伤,镜下观察未见结构异常改变,也未见炎性细胞浸润。而AD组镜下观察可见表皮、真皮层不同程度增厚,部分表皮脱落、坏死,可见大量炎症细胞浸润。4.Western Blot检测:AD组S100A7/β-actin 比值(1.36±0.12)高于对照组(0.77±0.05),AD 组 LOR/β-actin比值(1.22±0.19)高于对照组(0.73±0.09),AD 组 IVL/β-actin 比值(0.64± 0.05)低于对照组(1.07± 0.16),差异均有统计学意义(P<0.05)。S100A7/β-actin、LOR/β-actin、IVL/β-actin 与皮肤炎症程度相关系数分别是 0.579、0.504、-0.546。S100A7/β-actin 与 LOR/β-actin、IVL/β-actin 相关系数分别是 0.679、0.782。S100A7/β-actin与IL-4相关系数为0.792,中度正相关。5.ELISA检测结果:AD组小鼠血清总IgE浓度为(17.60±1.77)μg/mL与对照组(12.39±1.43)μg/mL相比增加;AD组血清总IL-4浓度(86.64±3.58)pg/mL与对照组(57.11±2.35)pg/mL相比增加,均有统计学意义(P<0.05)。血清中总IgE、IL-4浓度与AD组皮肤炎症程度相关系数分别是0.670、0.617,中度正相关。结论1.使用DNFB建立AD动物模型方法可行,为AD的临床实验研究提-供更多的可能性。2.EDC相关蛋白S100A7、IVL、LOR和皮肤炎症程度之间具有相关性,且EDC内部蛋白之间相互影响。3.表皮异常分化所引起的表皮屏障功能障碍可影响AD发病。