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为研究急性溃疡性结肠炎(UC)的临床表现、病理变化规律以及肠道潘氏细胞的数量、结构和功能变化,进一步揭示UC发病机制,本试验以7%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的UC小鼠模型为研究对象,对UC小鼠临床症状进行DAI评分;采用常规石蜡切片和H&E染色法研究诱导期内结肠、肝、肾、脾和肺病理变化并进行HI评分;采用H&E染色法和免疫组化染色对UC小鼠诱导期内肠道潘氏细胞变化进行研究;应用乙酸浸提法分离提取肠道内α-防御素并对其进行抑菌活性检测。研究结论和结果包括以下四个部分:(1)使用7%DSS可成功诱导BALB/c小鼠UC模型,诱导期内临床症状和结肠病理动态变化具有明显类似于人类UC的特征。结果如下:诱导期3d起,小鼠出现稀便、隐血、体重下降等临床症状。剖检见结肠远端水肿最为严重。DAI和HI评分随着诱导时间增加逐渐升高,且组间具有统计学差异(P<0.05)。5d与7d结肠病变与人类UC类似,主要表现为隐窝变形、融合和消失;黏膜上皮变性坏死,且隐窝损伤早于黏膜上皮损伤和炎症出现;诱导期3d与5d时,隐窝损伤评分与DAI评分具有显著相关性(r>0.90,P<0.05);在黏膜层内伴有数量不等的嗜酸性粒细胞浸润。(2)本研究中UC小鼠模型在诱导期内表现出与人类急性或慢性UC类似的肠外表现,以肝和肾最为明显。结果如下:诱导期7d时剖检见肝脏表面有多个坏死灶。两侧肾脏肿大,见出血与淤血灶。诱导期1d与3d,小鼠肠外表现不明显,而诱导期5d起,其在病理组织学上表现出明显的肠外表现,如肝细胞发生颗粒变性和严重的水泡变性,同时小叶间胆管上皮细胞变性增生,局部窦状隙扩张淤血严重;肾小管上皮细胞坏死及肾间质出血淤血严重;肺泡壁毛细血管淤血,局部肺泡腔内少量出血细支气管呈现炎症反应,固有结构不清。(3)诱导期内7%DSS未影响小肠各肠段潘氏细胞及α-防御素-4表达;诱导期1~5d,结肠未见潘氏细胞和α-防御素-4阳性表达;仅7d时,小鼠结肠增生隐窝内见见α-防御素-4阳性表达的潘氏细胞化生但无粗大嗜酸性颗粒的组织学特征。H&E染色法结果如下:回肠潘氏细胞数量最多,空肠次之,十二指肠最少,而结肠内未见潘氏细胞。小肠各肠段内潘氏细胞数目在诱导期1d、3d、5d与7d均无统计学差异。免疫组化结果如下:α-防御素-4在十二指肠潘氏细胞内表达缺失,而诱导期1~7d的空肠和回肠潘氏细胞阳性表达数在各组间无统计学显著差异(P>0.05)。诱导期1d与3d,结肠黏膜层中上皮细胞和隐窝中均未见阳性表达;诱导期5d,结肠黏膜上皮和隐窝损伤严重,但亦未见阳性表达。诱导期7d,阳性表达细胞位于增生隐窝内,周围见多量炎性细胞浸润。(4)7%DSS未明显影响小肠α-防御素抑菌活性,而诱导期内结肠的α-防御素无抑菌活性。结果如下:诱导期内小肠组织蛋白浸提液具有不同程度的抑菌活性,其中十二指肠最弱,空肠次之,回肠最强。同一肠段在诱导期内抑菌活性无统计学差异。而诱导期内结肠组织蛋白浸提液未检测出抑菌活性。本模型具有死亡率低、重复性好、操作简便,且临床症状急且重,结肠和肠外表现较突出伴有潘氏细胞化生的特点。研究结果表明UC过程诱导结肠潘氏细胞化生,同时表达无抑菌活性的α-防御素。这说明潘氏细胞和α-防御素异常表达参与UC发病机制。本研究通过诱导期内病理学和肠道潘氏细胞变化研究从整体上认识UC小鼠模型,有利于进一步研究DSS诱导机制,为利用模型进行不同临床药物试验提供给药参考时间,用于药效对比和特效药物研究,还将有助于人类急、慢性UC肠外表现的发病机理研究。