杠柳(Periploca sepium Bge)为萝藦科杠柳属植物，耐性好，具有广泛的适应性。是优良的固沙、水土保持、边坡绿化和煤矸石山生态恢复树种，也是我国传统中药材。随着杠柳药理作用以及生态效益的不断开发，市场需求增加，使得杠柳出现过度采挖，但其种苗繁育迟缓，货源少，进一步开展资源保护利用及人工培植工作困难重重。我国杠柳分布广泛，但是对杠柳分子水平研究非常缺乏，多集中于生理药理研究。本研究以河北省不同地理位置生长的杠柳为研究材料，利用ISSR分子标记方法对其遗传多样性进行研究，主要研究结果如下:　　1.本试验分别采用改良CTAB法、SDS法、试剂盒提取杠柳叶片DNA，通过浓度以及纯度检测，结合电泳图谱，确定了适用于杠柳ISSR分析的基因组DNA提取方法为改良CTAB法。　　2.从100条由哥伦比亚大学公布的ISSR通用引物中筛选出43条有扩增产物的引物，对随机选取的杠柳样本进行检验，进一步筛选条多态性高、稳定性好的引物，通过检测，34条引物具有多态性，其中多态性高效率引物8条。利用8条高效ISSR引物对11个不同地区的杠柳样本进行PCR检测，共检测到位点79个，其中多态性位点63个，占79.7％。　　3.通过对引物浓度、模板DNA浓度、退火温度、循环次数等因素的研究，建立了适合杠柳基因组的ISSR反应体系:总反应体积25μL，其中Taq MasterMix，12.5μL，模板DNA1μL，正向引物和反向引物各1μL，ddH2O9.5μL。　　4.利用NTSYS-pe2.10e软件计算供试材料间的遗传相似系数，得相似性矩阵。遗传相似系数(GS)可以揭示不同地区种质间彼此遗传关系远近，GS值越大说明材料间亲缘关系越近;GS值越小表明亲缘关系越远。11个不同地区供试样品遗传相似系数变化范围在0.3545～0.8545，其中供试样品6与9亲缘关系最近，遗传相似性系数高达0.8545，供试样品6与10亲缘关系最远，遗传相似性系数仅为0.3545。结果表明，不同地区杠柳种质资源遗传差异比较显著。　　5.利用NTSYS-pc2.10e软件对11份供试样品进行UPGMA聚类分析，通过Treeplot模块生成聚类分析树状图。11个不同地区种质材料在相似系数为0.60水平上分为三大类，第Ⅰ类为来自石家庄赞皇、邢台内丘、沙河、邯郸涉县和武安的样品。第Ⅱ类共包括5份种质，分别来自于保定易县、满城、阜平、涞水、涞源。来自张家口的样品作为单独一支为第Ⅲ类。由此可见，杠柳种质亲缘关系与地理分布呈一定相关性，其生长区域越近其亲缘关系越近，充分体现了地域分布和环境对杠柳的影响。