目的 本文采用一种新型亲和免疫组织化学染色技术—生物素-链酶亲和素（Biotin-Streptavidin,BSA）系统,检测188份各型乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMC）中T淋巴细胞亚群（CD₃⁺、CD₄⁺、CD₈⁺、CD+（25）⁺）的百分比,以期进一步探讨乙型病毒性肝炎的发病机制,T淋巴细胞亚群表达水平变化在乙型肝炎中的意义,及BSA技术在T细胞亚群测定方面的临床应用价值。 方法 采用聚蔗糖—泛影葡胺（Ficoll）分离液密度梯度离心法直接从新鲜肝素抗凝血中分离PBMC,以含有10%小牛血清的RPMI-1640培养液重悬PBMC,并调整其浓度为大约2×10⁶/ml,取10μl,以BSA法测定T细胞亚群(CD₃⁺、CD₄⁺、CD₈⁺、CD₂₅⁺)的百分比。另取0.5ml置24孔培养板,用植物血凝素（PHA）作为刺激原,加0.5ml PRMI-1640完全培养液,于37℃含5%的CO2培养箱孵育培养48h,收集细胞,调成浓度约为2×10⁶/ml,再用BSA法测定CD₂₅⁺的浓度。再以PCR法测定PBMC内HBV DNA的感染率。 结果 实验结果显示:与正常对照相比,乙肝病人PBMC中T淋巴细胞亚群表达水平CD₃⁺、CD₄⁺降低,CD₈⁺升高,CD₄⁺/CD₈⁺比值降低,CD25表达水平在PHA诱导前后均降低,差异有显著意义（P<0.01）;另外,乙肝病人PBMC中HBV-DNA（+）病人与PBMC内HBV-DNA（-）病人相比,CD25表达水平亦存在较大差异（P<0.01）。 结论 乙肝病人体内存在明显的细胞免疫功能紊乱,表现为T细胞亚群的表达水平降低及其比例失衡,T细胞活化障碍,并与肝病的慢性化相关;BSA也是一种测定T细胞亚群的简便易行而有效的方法。