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目的使用快速高分离液相色谱-三重四级杆质谱联用系统(rapid resolution liquid chromatography system coupled with triple quadrupole mass spectrometry,RRLC-QQQ-MS),建立相关非法添加违禁成分的质谱鉴定方法,实现对部分中药产品中非法添加违禁成分的快速定量检测分析。方法 1.采用 Agilent SB-C18色谱柱(2.1mm×50mm,5μm),乙腈(含 0.1%甲酸)-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.2mL·min-1;基于电喷雾离子(electrospray ionization,ESI)源离子化待测组分,结合正负离子、多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描模式,建立了盐酸西布曲明、呋塞米和盐酸麻黄碱的快速高分离液相色谱-质谱联用方法,检测7种减肥药中3种违禁成分的含量。2.采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱(3mm×50mm,2.7μm),柱温35℃,乙腈(含0.1%甲酸)-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3mL·min-1;采用电喷雾离子源(ESI),以正离子、多反应监测(MRM)扫描模式,建立蛇酒中5种糖皮质激素(醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松、醋酸地塞米松、布地奈德和甲泼尼龙)的快速高分离液相色谱-电喷雾质谱联用方法,结合糖皮质激素的二级谱图信息,对相应物质进行定性定量检测。3.采用AgilentPoroshell 120 EC-C18色谱柱(3mm×100mm,2.7μm);柱温35℃,流速0.3mL·min-1;进样量5μL;流动相:(A)0.1%甲酸水溶液-(B)乙腈(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾离子源(ESI),以正离子检测、全扫和多反应监测(MRM)扫描方式,建立了 4大类20种化妆品中7种糖皮质激素(醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松、醋酸地塞米松、甲泼尼龙、醋酸曲安奈德、曲安西龙和泼尼松龙)的快速高分离液相色谱-电喷雾质谱联用方法,同时结合二级质谱图对相应化合物的裂解方式进行解析。结果1.以质荷比166.1-148.1(盐酸麻黄碱)、280.1-124.9(盐酸西布曲明)和329.0-284.9(呋塞米)作为扫描离子,建立了基于RRLC-QQQ-MS的盐酸西布曲明、呋塞米和盐酸麻黄碱的质谱定量分析方法,实现了对7种市售减肥药中盐酸西布曲明、呋塞米和盐酸麻黄碱的快速定量检测。7种减肥药中均检测到盐酸西布曲明和盐酸麻黄碱,含量分别为0.39～4.29μg·g-1和1.63～8984.18μg·g-1,1种减肥药中检测到呋塞米,含量为8.71μg·g-1。2.结合蛇酒性质优化实验条件,采用氮气挥干乙醇、甲醇复溶的方法处理样品,以质荷比401.2-383.1(醋酸泼尼松)、405.3-327.2(醋酸氢化可的松)、435.3-309.2(醋酸地塞米松)、431.2-413.1(布地奈德)和375.2-357.3(甲泼尼龙)作为扫描离子,并根据相应的二级谱图进行比对,建立了基于RRLC-QQQ-MS的醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松、醋酸地塞米松、布地奈德和甲泼尼龙的定量分析方法,实现了对10种市售蛇酒中的非法添加糖皮质激素的快速检测。10个样品中8个检测到糖皮质激素,且中短效糖皮质激素醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松和甲泼尼龙的含量分别为1.94～323.0μg·mL-1、7.23～454.1 8μg·mL-1和2.45～31.19μg·mL-1,长效糖皮质激素醋酸地塞米松含量为0.51～6.37μg.mL-1,1个样品中检测到少量吸入型糖皮质激素布地奈德,含量为0.93μg.mL-1。3.依据化妆品种类(化妆水类、乳液类、膏霜类和粉脂类)的不同,进行基质效应的考察,同时优化样品前处理方法,采用真空冻干和甲醇溶解相结合的方式提取待测组分,结合MRM扫描模式,以质荷比401.2-383.1(醋酸泼尼松)、405.3-327.2(醋酸氢化可的松)、435.3-309.2(醋酸地塞米松)、375.2-357.1(甲泼尼龙)、395.2-357.1(曲安西龙)、477.1-439.2(醋酸曲安奈德)和361.2-343.4(泼尼松龙)作为扫描离子,并结合化合物的二级谱图对其质谱裂解方式进行解析,建立了基于RRLC-QQQ-MS的醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松、醋酸地塞米松、甲泼尼龙、醋酸曲安奈德、曲安西龙和泼尼松龙的质谱定量方法,实现了对市售4大类20种化妆品中7种糖皮质激素的快速定量检测。20个化妆品中18个检测到糖皮质激素,且多个样品检测到多种违禁成分,中短效糖皮质激素醋酸泼尼松、醋酸氢化可的松、甲泼尼龙、泼尼松龙和曲安西龙的含量分别为4.37～40.1 1μg·g-1、3.18～83.88μg·g-1、1.51～765.44μg·g-1、1.66～8.77μg·g-1和2.45～31.19μg·g-1,长效糖皮质激素醋酸地塞米松和醋酸曲安奈德的含量为1.64～16.77μg·g-1和1.26～21.20μg·g-1。结论1.本研究通过优化样品前处理条件和色谱条件,明显增加了标准品的分离度,同时结合质谱的MRM模式,以保留时间和母离子作为定性指标,以特征子离子作为定量指标,显著提高了待测组分的检测专属性和精确性,避免了检测的假阴性,具有一定的参考价值,可为市场监督部门提供有力依据。2.本研究基于RRLC-QQQ-MS的高选择性、高灵敏性和高分离能力,建立的快速高分离液相色谱-电喷雾质谱联用法具有方便快捷、准确度高、检测限低、运用范围广等优点,适用于复杂基质条件下,部分中药产品中非法添加违禁成分的快速检测。3.研究发现多批次产品均检测到违禁成分,推断目前市面上部分中药产品中非法添加违禁成分的现象较为普遍,且违禁成分添加已由过去单一品种、大剂量添加转变为多品种、少剂量添加,这应当引起相关市场监督部门和消费者的重视。