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环十五内酯属大环麝香类香料,广泛应用于香水、香精、化妆品、食品、医药等领域。目前该产品仅能以化学合成法生产。本文以ω—羟基十五烷酸为底物,以微生物脂肪酶为催化剂,合成环十五内酯。研究主要内容包括四个方面:(1)合成环十五内酯脂肪酶菌株的筛选;(2)脂肪酶生产条件的优化;(3)脂肪酶的分离纯化;(4)探讨影响ω—羟基十五烷酸关环因素。 首先,通过大量实验,筛选得到了十五株产脂肪酶的菌株,其中有六株所产脂肪酶具有催化合成环十五内酯的能力。进而重点对菌株GXU01与GXU03进行脂肪酶生产条件的探索。结果表明GXU01与GXU03摇瓶发酵产脂肪酶酶活力分别达20.69U/ml与16.89U/ml。二种菌株所产脂肪酶均在pH=7.0,反应温度为40℃时水解活力最高。其热稳定性为:GXU01脂肪酶在50℃下保温15分钟,酶活力损失仅20%;GXU03脂肪酶在50℃下保温15分钟,酶活力损失仅30%。然后,用硫酸铵分级沉淀发酵上清液,发现了GXU01脂肪酶活力主要分布在40%~50%的硫酸铵饱和度,而GXU03脂肪酶活力主要分布在40%~60%的硫酸铵饱和度。并用凝胶色谱层析分离纯化GXU01脂肪酶得到了二种脂肪酶,分离后的二种脂肪酶可能均有催化合成环十五内酯的能力。最后,用自制西人学硕十论文《大环内酷化脂肪酶筛选及其酶法合成环十1五内醋》脂肪酶进行了环十五内醋合成研究,实验结果指出,脂肪酶最宜合成反应p日值为6.0,在环已烷中催化能力比在苯中要高。同时考察了不同脂肪酶在不同溶剂中催化合成环十五内醋能力,其中假丝酵母属来源的脂肪酶在环已烷中的催化环化能力比在苯中高。而青霉属的GXU14正好相反,在苯中的催化环化能力为在环已烷中的3.4倍。结果给出了在GXU01脂肪酶催化作用下15一轻基十五烷酸转化率高达88%,具有应用前景。