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目的:研究鲜驴奶抑制肿瘤生长的作用及其机制。
方法:(1)体外实验: 倒置相差显微镜观察不同浓度驴奶作用癌细胞后的形态学变化;采用四甲基偶氮噻唑蓝MTT法测定不同浓度驴奶对人肺癌细胞株(A549)、人胃癌细胞株(MGC-803)、人乳腺癌细胞株(Bcap-37)生长的抑制作用;流式细胞术分析驴奶诱导癌细胞凋亡作用。(2)体内实验:通过将120 只小鼠随机分为2 大组,分别于腋下和腹腔接种S180 肿瘤细胞悬液造模,腋下接种为实体瘤组,腹腔接种为腹水瘤组,灌胃分低剂量组(30 ml·kg-1·d-1)、中剂量组(60 ml·kg-1·d-1)、高剂量组(120 ml·kg-1·d-1),实体瘤组连续给予鲜驴奶(受试物)2 周,腹水瘤组给予至小鼠死亡,另外设立模型对照组和环磷酰胺组(CTX),环磷酰胺组腹腔注射20 mg·kg-1·d-1,隔日腹腔注射1次,共7次,模型对照组给予同体积的蒸馏水,干预结束后第1天测定肿瘤组织病理形态学,抑瘤率、脏器指数相关指标,并用免疫组化法检测小鼠S180 肿瘤组织中与细胞周期相关的基因Ki67与Cyclin D1的表达。
结果:MTT 法和显微镜观察显示驴奶能不同程度抑制癌细胞的增殖,可致细胞形态学改变;流式细胞仪检测显示0.01和0.05g/ml 浓度驴奶作用三种癌细胞24h后,3种癌细胞的凋亡率均高于空白对照组(p<0.05);鲜驴奶中、低剂量组对S180 实体瘤小鼠的脾指数高于模型对照组(p<0.05),鲜驴奶低、中剂量组平均瘤重低于模型对照组(p<0.05),抑瘤率分别为27.78%与50.69%。高剂量组平均瘤重与模型对照组相比较未见差异(p>0.05)。环磷酰胺(CTX)组、鲜驴奶低、中和高剂量组的平均存活天数均高于模型对照组(p<0.05)。免疫组化法检测结果显示环磷酰胺(CTX)组、低剂量组和中剂量组Ki67、CyclinD1阳性表达率与模型对照组比较,均明显下降,差异均有统计学意义(均p<0.05);CTX 组Ki67、CyclinD1 表达率明显低于低剂量组和中剂量组(均p<0.05)。
结论:鲜驴奶对癌细胞(人肺癌细胞株(A549)、人胃癌细胞株(MGC-803)、人乳腺癌细胞株(Bcap-37))生长具有抑制作用;鲜驴奶可抑制S180小鼠实体瘤生长,延长S180 腹水瘤小鼠的生存时间;驴奶抑制肿瘤的可能机制:促进肿瘤细胞的凋亡,下调Ki67与Cyclin D1的表达,调控细胞周期,抑制肿瘤细胞的增殖。