无患子皂苷对甜菜夜蛾生物活性的研究及其化学成分分析

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无患子Sapindus Saponaria为无患子科Sapindacea无患子属Sapindus落叶乔木,是一种综合利用价值较高的经济树种,其假种皮中含有大量皂苷成分。目前有关无患子皂苷抗菌、抗肿瘤、保护心脑血管、杀虫等方面的研究均有所报道。鉴此,本文以无患子为材料,采用水提法提取了无患子皂苷,通过饲料混毒法和浸虫法测试了无患子皂苷对甜菜夜蛾幼虫的毒杀活性,利用不同浓度无患子皂苷处理后的混毒饲料喂养甜菜夜蛾幼虫,测定了与甜菜夜蛾幼虫生长发育及繁殖相关的各项指标,并探讨了无患子皂苷对甜菜夜蛾体内解毒酶的影响,采用液相色谱-质谱联用仪(HPLC-MS)定性分析了无患子皂苷中的主要化学成分。旨在为无患子皂苷开发成低毒、高效的植物源农药提供理论依据和科学指导,主要研究结果如下:1.无患子皂苷对甜菜夜蛾幼虫的杀虫活性:无患子皂苷对甜菜夜蛾2、3、4龄幼虫均具有一定的触杀活性和胃毒活性,且活性随着浓度的增加而增强。无患子皂苷对甜菜夜蛾4龄幼虫的胃毒作用优于2、3龄幼虫,药后第6 d,16 mg/g的混毒饲料对甜菜夜蛾4龄幼虫的防效较好,校正死亡率为76.67%;无患子皂苷对甜菜夜蛾2、3龄幼虫的触杀效果优于4龄幼虫,药后第1 d,64 mg/mL的无患子皂苷对甜菜夜蛾3龄幼虫的控制作用较好,校正死亡率为43.33%。2.无患子皂苷对甜菜夜蛾生长发育及繁殖的影响:无患子皂苷对甜菜夜蛾2、3、4龄幼虫的生长发育及繁殖具有不同程度的影响。首先,无患子皂苷能够降低甜菜夜蛾幼虫的化蛹率以及卵孵化率,4mg/g混毒饲料处理下的甜菜夜蛾2龄幼虫的化蛹率,相比空白对照组降低46.43%,8 mg/g毒饲料处理下的甜菜夜蛾3、4龄幼虫的化蛹率,相比空白组分别降低89.29%、74.04%;2mg/g混毒饲料处理下甜菜夜蛾2龄幼虫的卵孵化率相比空白对照组下降16.12%,4 mg/g混毒饲料处理下甜菜夜蛾3龄幼虫的卵孵化率相比空白对照组下降28.55%;其次,无患子皂苷能够延长甜菜夜蛾的发育历期,4 mg/g混毒饲料处理下2龄幼虫的幼虫期相比空白对照组,延长了 8.55 d,8 mg/g混毒饲料处理下甜菜夜蛾3、4龄幼虫的幼虫期相比空白对照组分别延长了 3.88d、5.64 d;除此之外,无患子皂苷还能够使甜菜夜蛾的体重和蛹重减轻,16 mg/g混毒饲料处理下甜菜夜蛾2、3、4龄幼虫的体重相比空白对照组分别降低了 79.65%、71.83%、82.93%;4 mg/g混毒饲料处理下2龄幼虫的蛹重相比空白对照组降低了41.13%,8 mg/g混毒饲料处理下甜菜夜蛾3、4龄幼虫的蛹重相比空白对照组分别降低了 57.25%、83.65%;无患子皂苷对甜菜夜蛾的雌性比有一定的影响,但与空白对照组之间差异不显著。3.不同浓度无患子皂苷对甜菜夜蛾体内解毒代谢酶活力的影响:无患子皂苷对甜菜夜蛾3龄幼虫体内的GSTs、AChE、CarE三种酶均具有一定的抑制作用。在药后24h时,当药剂浓度为64mg/mL时,对GSTs抑制作用明显,酶活力为同期空白对照组的0.67倍;在药后48h时,当药剂浓度为64mg/mL时,对AChE抑制作用明显,酶活力是同期空白对照组的0.56倍;在药后72 h时,当药剂浓度为32 mg/mL、64 mg/mL时,对CarE抑制作用明显,酶活力分别是同期空白对照组的0.81、0.79倍;此结果反映出甜菜夜蛾在接触无患子皂苷处理后导致其死亡的原因,同时也可表明解毒代谢酶参与了试虫对无患子皂苷的防御机制。4.无患子皂苷的化学成分分析:通过HPLC-MS对无患子果皮中皂苷类成分进行鉴定,本研究共鉴定了 43种皂苷类化合物,其中20种主要的皂苷类物质已鉴定出具体的结构式和分子式,另外23种皂苷类化合物只鉴定出分子式。上述20种皂苷类物质,共计包括14种三萜皂苷和6种倍半萜皂苷,三萜皂苷和倍半萜皂苷分别占70%和30%。
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