百合科菝葜属植物黑刺菝葜(Smilax Scobinicaulis C.H.Wright)的根茎中含有大量的甾体皂苷,其中6-酮型甾体皂苷含量丰富。其与茶甾酮(teastereone)型油菜素甾醇类化合物有相同的官能团,可能表现出相似的活性。前期研究表明这类化合物具有显著的植物活性,能促进种子萌发,幼苗生长等,可作为植物生长调节剂进行开发;且其资源丰富。因此对6-酮型甾体皂苷的开发利用具有重要意义。但到目前为止,还没有建立起相应的简易、有效的定量分析方法,也没有其相关的制剂问世。本文经过对显色剂的筛选,星点设计-效应面法优化显色条件,建立了 6-酮型甾体皂苷元含量测定方法;以黑刺菝葜甾体皂苷提取物为对象,通过对溶剂、表面活性剂的筛选研制6-酮型甾体皂苷可溶性液剂,并进行药效活性测定。主要试验内容如下:1.得到了 6-酮型甾体皂苷元含量测定方法。以拉肖皂苷元为对照品,通过可见光全波长扫描、精密度、稳定性试验对显色剂进行筛选,确定以茴香醛-浓硫酸II(A试剂:0.5%茴香醛的乙酸乙酯溶液,B试剂:50%浓硫酸的乙酸乙酯溶液)为本试验的显色剂,最大吸收波长为429nm;进过单因素实验和显色条件优化,得到了最佳显色条件:样品溶剂挥干,加入2 mL乙酸己酯,摇匀后,依次加入1.2 mL的A、B试剂,69.5 ℃水浴反应26.3 min,取出后冰水浴10 min,终止反应,在429 nm处测定显色体系吸光值,并计算含量。2.确定了 0.1%6-酮型甾体皂苷可溶性液剂的配方。利用有效成分的在溶液中的溶解度筛选溶剂的种类和配比,通过冷贮稳定性、热贮稳定性和稀释稳定性确定乳化剂的种类和用量,最终确定该可溶性液剂的组成:皂苷浸膏0.5%(质量体积比)、β-环糊精(两者物质的量之比1:1)0.64%,吐温80 15%,无水乙醇30%,二甲基亚砜补齐至100%。经过试验证明该制剂的各项理化指标均符合相关的国家标准。并制定了该制剂的质量分析标准。3.测定了 0.1%6-酮型甾体皂苷可溶性液剂的生物活性。由于适宜浓度的6-酮型甾体皂苷可促进萝卜幼苗生长,故本部分研究以萝卜幼苗子叶增重情况、胚轴增粗和伸长情况对不同浓度的药剂水溶液进行药效评价,并确定了其使用的最适浓度。试验结果表明:10-7mol·L-1的可溶性液剂(即将药剂稀释104倍)促生长活性最强,浓度升高或降低都会影响促生长的效果。