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中药制剂是中药与其临床防治疾病应用的纽带,而制剂原料的研究作为中药剂型设计的基础,是中药发挥临床疗效的保证。组分结构研究是获得未来组分中药制剂原料的关键,其包含着中药组分代表性成分的筛选辨识、组分结构优化以及组分整体性质表征的科学内涵。本课题以国家十一五支撑计划“基于中药有效成分群的中药组方设计技术研究”中子课题“与血瘀型胸痹相关的中药有效成分群组方设计技术研究”(课题编号:2008BAI51B03)为基础,以“参芍舒胸方”中的三七为研究对象,通过多种现代科学技术,筛选辨识三七中防治心肌缺血活性组分的代表性成分,进行组分结构特征解析,并对其组分整体生物药剂学性质进行表征。主要研究内容如下:1.三七防治心肌缺血皂苷组分代表性成分的辨识研究通过TCMSP数据库,将三七1 19个成分与心肌缺血的关键受体蛋白进行分子对接,并与上市药物对接活性进行对比,经筛选发现Libdockscore分值大于上市药物均值且与上市药物作用残基高度相似的均为三七中的皂苷类成分,确证三七皂苷组分是三七中防治心肌缺血的活性组分;对三七皂苷组分的入血成分进行质谱鉴定研究,发现入血成分为三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Rd;经筛选辨识,三七皂苷组分的代表性成分为三七皂苷Ri、人参皂苷Rgi、Rbi、Rd。2.防治心肌缺血的三七皂苷组分结构解析及优化采用HPLC对三七皂苷组分进行结构初步解析,三七皂苷Ri含量为7.82%,人参皂苷Rgi含量为29.93%,人参皂苷Rbi含量33.86%,人参皂苷Rd含量为8.64%。4个成分的量比关系为1.00/3.83/4.33/1.10。建立DPPH、·OH、02·-自由基体外反应体系,研究发现不同浓度的三七皂苷组分溶液对不同自由基均有一定的清除能力,综合考虑各项因素,选取三七皂苷组分浓度0.62mg/mL作为后续组分结构优化均匀设计的原始浓度,并通过均匀设计法设计出6个三七皂苷组分结构优化组,通过体外自由基清除实验优选三七皂苷组分结构。结果表明三七皂苷组分最优结构组为三七皂苷R1/人参皂苷Rg1/人参皂苷 Rbi/人参皂苷 Rd=1/7.66/12.96/6.60。3.三七防治心肌缺血皂苷组分体内药效验证利用盐酸异丙肾上腺素(ISO)皮下注射(10～50 mg/kg/d,连续2 d)大鼠制备心肌缺血模型,从心电图、心脏指数、心肌酶、致死情况多个角度,将ISO的造模剂量设为30 mg/kg/d,连续2d。对三七皂苷组分防治心肌缺血的药效剂量进行研究,从与心肌损伤有关的心肌酶天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和氧化应激超氧化物歧化酶(SOD)药效角度发现,200 mg/kg/d,连续7 d的剂量在降低心肌损伤和提高机体抗氧化能力方面药效显著,故以此剂量作为与三七皂苷组分结构优化组体内药效对比验证剂量。验证研究表明,三七皂苷组分结构优化组可明显改善心肌缺血大鼠HE病理形态,能明显降低心肌缺血大鼠血清中AST、LDH活力,提高SOD活力并降低丙二醛(MDA)含量,表明其对大鼠心肌缺血损伤具有显著的保护作用。4.三七皂苷组分的整体生物药剂学性质表征在不同pH磷酸盐缓冲溶液环境下,分别测定三七皂苷组分中各代表性成分的平衡溶解度和油水分配系数,并利用向量夹角余弦函数法进行相似性分析,成分两两之间的相似系数均大于0.90,说明三七皂昔组分代表性成分的平衡溶解度和油水分配系数具有相似性,并引入质量权重系数拟合表征组分的整体生物药剂学性质。结果发现,三七皂苷组分整体平衡溶解度为51.72～69.63 mg/mL。但理化性质(溶解度)不能全面地表示生物药剂学性质上的溶解特性,通过单位剂量的所需溶媒量换算后,三七皂苷组分的溶解性能高。三七皂苷组分整体油水分配系数在0.49～1.76,属于低渗透性范畴。依据中药组分生物药剂学分类系统(BCSCC),三七皂苷组分整体归属于高溶解度、低渗透性药物。