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目的:通过研究“宣肺健脾法”中药汤剂对小鼠肠道中Cajal细胞数量的影响,以及在Cajal细胞中Akt、p-Akt蛋白的表达情况,阐明Cajal细胞的变化与Akt、p-Akt的关系,从而进一步探讨宣肺健脾法对慢性传输型便秘小鼠肠道Cajal细胞影响的药理机制。方法:1.选取健康成年CD-1(ICR)IGS小鼠50只,随机分为空白对照组、模型对照组、宣肺健脾组、PI3K抑制剂预处理+宣肺健脾组、莫沙必利组各10只,除空白对照组外,其他各组按照Akra的造模方法制备成慢传输型便秘小鼠模型,每天给小鼠灌胃洛哌丁胺(1.5mg/kg·d)2次,连续灌胃5天;2.造模结束后,予宣肺健脾组小鼠宣肺健脾之中药汤剂、予PI3K抑制剂预处理+宣肺健脾组小鼠PI3K抑制剂腹腔注射预处理及中药汤剂灌胃、予西药组小鼠莫沙必利灌胃,每日两次,连续给药14天;3.给药结束后,取空白对照组及模型对照组小鼠进行造模评价;各组随机选取6只小鼠,免疫荧光染色法检测Cajal细胞,镜下统计Cajal细胞在纵肌层、肌间丛、环肌层及粘膜下沿环肌层的总数;通过免疫荧光标记小鼠结肠内Cajal细胞表面特异性抗原,应用流式细胞仪分选出高纯度的Cajal细胞,用Western Blot方法检测Cajal细胞内Akt、p-Akt蛋白的表达情况。4.用统计学方法对各组数据做出评价,采用SPSS 17.0对各组数据进行统计分析,计量资料以均数±标准差((?)±s)表示,采取t检验,结果以(P﹤0.05)认为差异具有统计学意义。结果:1.造模情况:与空白对照组比较,模型对照组小鼠粪便表面水分减少,明显干硬,粪便颗粒短小,接近球状,32小时粪便粒数、干重、碳沫灌胃40min推进率差异具有统计学差异(P﹤0.05),说明造模成功。2.Cajal细胞数量:与空白对照组相比,模型对照组、宣肺健脾组Cajal细胞数量差异具有统计学意义(P﹤0.05);与模型对照组相比,宣肺健脾组、PI3K抑制剂预处理+宣肺健脾组差异不具有统计学意义(P﹤0.05),莫沙必利组有统计学差异(P>0.05);莫沙必利组与宣肺健脾组相比具有统计学差异(P﹤0.05)。3.蛋白表达情况:Akt、p-Akt蛋白量呈现同步趋势,即与空白对照组相比,模型对照组的两种蛋白量差异均具有统计学意义(P﹤0.05);与模型对照组相比,宣肺健脾组、PI3K抑制剂+宣肺健脾组、莫沙比利组两种蛋白量差异均具有统计学意义(P﹤0.05),提示慢传输型便秘小鼠的结肠Cajal细胞表达的Akt、p-Akt蛋白增多,宣肺健脾法之中药汤剂可以使慢传输型便秘小鼠结肠Cajal细胞表达的Akt、p-Akt蛋白量减少,PI3K抑制剂与宣肺健脾之中药汤剂程协同作用,而莫沙必利也可能使STC小鼠结肠Cajal细胞表达Akt、p-Akt蛋白量减少,但程度较宣肺健脾组偏低。结论:慢传输型便秘小鼠的结肠Cajal细胞表达的Akt、p-Akt蛋白增加,宣肺健脾法中药汤剂可能通过抑制PI3K/Akt通路使Cajal细胞凋亡减少,而莫沙必利对小鼠结肠ICC细胞PI3K/Akt通路的调节作用较宣肺健脾之中药汤剂偏弱,对Cajal细胞数量的影响不明确。宣肺健脾法之中药汤剂可以对慢传输型便秘有着良好的疗效。