山羊FSH受体基因第10外显子多态性及其与繁殖性状关系的研究

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实验选用波尔山羊44只,莱芜黑山羊76只,波尔山羊与莱芜黑山羊的杂交羊21只作为实验动物,将FSHR基因第10外显子作为影响山羊产羔性状的候选基因,对其第10外显子进行扩增、测序、序列比较和PCR-SSCP检测,探讨了FSHR基因第10外显子的遗传特征。运用最小二乘线性模型,对所发现的多态位点与山羊产羔性状的关系进行了分析。所得结果如下:1、根据牛FSHR基因序列设计引物,以波尔山羊和莱芜黑山羊基因组为模板,应用PCR技术,克隆和测定了FSHR基因第10外显子序列,并与牛该区段序列进行了比较分析。结果表明,PCR扩增获得的片断为1643bp,其中三畜种FSHR基因第10外显子长均为1233bp。莱芜黑山羊和波尔山羊的第10外显子序列与牛该序列相比,同源性分别为97.49%和97.41%,分别在31和32处发生碱基突变,均引起10处氨基酸密码改变。波尔山羊与莱芜黑山羊相比,该序列同源性为99.60%,在3处发生碱基突变,其中+1184和+1365处突变引起氨基酸密码改变。2、采用PCR-SSCP技术对山羊FSHR基因第10外显子进行多态性分析。结果表明:在该区所划分的8个亚片段上,发现只有E10-1片段存在多态。在3个山羊群体中,波尔山羊中发现3种基因型(AA、BB、AB),莱芜黑山羊中发现了4种基因型(AA、BB、AB、DD),在波×黑杂交群体中发现了4种基因型(AA、BB、AB、DD)。其中,AA基因型和A等位基因的频率均为最高。对此片断测序分析,发现分别在FSHR基因的14527和14566处分别发生G→T及A→G碱基突变。3、X~2检验表明,波尔山羊(x~2=7.49)和莱芜黑山羊(x2=11.07),处于Hardy-Weinberg不平衡状态(P<0.05);杂交山羊群体(x2=0.70),处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。多态信息含量分析显示,波尔山羊群体为低度多态,莱芜黑山羊和杂交羊群体均为中度多态。4、应用SAS软件对波尔山羊和莱芜黑山羊群体不同基因型间的产羔数进行最小二乘一般线性模型(GLM)分析。结果表明,两品种中基因型与产羔数差异不显著(P>0.05),在黑山羊中AA基因型在产羔数上显
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