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目的:本实验旨在研究普萘洛尔对兔成骨细胞的增殖和分化及破骨细胞形成的影响,探讨普萘洛尔对骨代谢的影响机制,为更深入认识普萘洛尔在骨代谢中发挥的作用提供线索和依据。材料和方法:(1)提取兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),诱导为成骨细胞(OB),并通过ALP染色和茜素红染色对其进行鉴定。(2)以兔OB为体外实验模型,以不同浓度普萘洛尔(10-2μmol/ml,10-3μmol/ml,10-4μmol/ml)分别刺激体外培养的兔OB后,用MTT法检验普萘洛尔对兔OB增殖能力的影响,用RT-PCR法检验成骨细胞中OPG和RANKL mRNA的表达,用ELISA检测上清液中OPG和RANKL蛋白的含量。(2)分离培养兔破骨细胞(OC),以不同浓度普萘洛尔(10-2μmol/ml,10-3μmol/ml,10-4μmol/ml)分别刺激体外培养的兔OC72 h后,用TRAP及甲苯胺蓝染色检测其对OC的影响。结果:1)通过ALP染色和茜素红染色证实所诱导的为成骨细胞;2)与不加普萘洛尔的对照组相比,不同浓度的普萘洛尔给药48h,72h,OD值均高于对照组(P<0.05),有统计学意义;96h后实验组OD值均低于对照组(P>0.05),没有统计学意义,并且48h和72h时在普萘洛尔10-3μmol/ml时,OD值最大(P<0.05);3)ELISA和RT-PCR结果均显示普萘洛尔作用于成骨细胞后,OPG含量均高于对照组,RANKL则相反,OPG/RANKL的比值实验组也均高于对照组。4)与对照组相比,10-2μmol/ml,10-3μmol/ml,10-4μmol/ml组普萘洛尔均能降低破骨细胞数目和骨吸收陷窝面积(P﹤0.05)。结论:1、普萘洛尔作用于成骨细胞一定时间内可以促进成骨细胞增殖;2、普萘洛尔通过升高OB中OPG的表达,抑制RANKL的表达,间接通过升高OPG/RANKL比值促进OB增殖,抑制破骨分化,进而对骨再生和骨吸收进行调节。