丙泊酚对TNF-α诱导的血管内皮细胞凋亡及caspase-8表达的影响

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目的观察TNF-α造成血管内皮细胞凋亡的形态学变化,以及不同浓度丙泊酚对血管内皮细胞凋亡指数及凋亡蛋白酶caspase-8表达的影响。方法将人脐静脉内皮细胞接种于6孔培养板,继续培养至细胞呈融合状态,随机分为6组:(丙泊酚浓度用P表示,单位是μmol/L)A组(P0);B组(P25);C组(P0+TNF-α);D组(P25+TNF-α);E组(P50+TNF-α);F组(P100+TNF-α)。按上述分组,在相应组中加入不同浓度的丙泊酚,于37℃,5%CO2培养箱内孵育30min,再在相应组中加入TNF-α终末浓度为2000U/ml,置于培养箱中24h。用流式细胞术检测细胞凋亡指数,免疫细胞化学法测caspase-8表达。结果各组血管内皮细胞凋亡指数和caspase-8表达比较结果:C组(P0+TNF-α)较其它五组均明显升高(P<0.05);D组(P25+TNF-α)较C(P0+TNF-α)组降低(P<0.05),但仍高于其他四组(P<0.05);E组(P50+TNF-α)较D组(P25+TNF-α),C组(P0+TNF-α)降低(P<0.05),但仍高于其他三组(P<0.05);F组(P100+TNF-α)较E组(P50+TNF-α),D组(P25+TNF-α),C组(P0+TNF-α降低(P<0.05),但仍高于A(P0)组和B组(P25)组(P<0.05);A(P0)组和B组(P25)差异无统计学意义(P>0.05)。结论1)TNF-α可引起血管内皮细胞凋亡;2)TNF-α引起血管内皮细胞凋亡时caspase-8的表达增多;3)丙泊酚可以抑制TNF-α引起的血管内皮细胞凋亡及caspase-8表达增多;4)丙泊酚对血管内皮细胞凋亡的抑制作用(抑制caspase-8表达)与剂量相关。
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