液相色谱-质谱技术（LC-MS）已经成为代谢组学研究中最有效的工具之一。它具有分离能力强、灵敏度和选择性高的特点,同时还拥有诸多公用数据库,具有较好的定性能力。然而,LC-MS技术分析不易电离的代谢物时,因离子化效率差而导致检测灵敏度低,限制了该技术的适用范围。衍生化技术的存在及稳定同位素标记技术在代谢分析领域的发展很好地解决了这些难电离代谢物离子化效率差的问题,研究者们通过引入易电离基团大大提高了该类化合物的检测灵敏度,同时也根据同位素标记法的应用特点在LC-MS平台上建立了诸多有效的分析方法。但是,原代谢物经衍生后因为分子结构的改变而导致其在串联质谱中的碎裂规律发生改变,公用数据库的谱图搜索功能不再适用。因此,分析衍生后的代谢物的碎裂规律为对于复杂样品中的代谢物定性分析有着重要意义。脂肪酸与胆汁酸在人体中具有重要的生理病理功能,但作为离子化效率低的羧基化合物,它们在复杂样品中的检测通常会使用稳定同位素衍生化试剂来提高其检测灵敏度,并建立相关的分析方法。此时,它们的质谱碎裂规律发生改变导致无法匹配谱图。因此,我们将脂肪酸与胆汁酸作为研究对象,采用稳定同位素标记技术,结合衍生后的脂肪酸与胆汁酸多级质谱碎裂规律,建立了完整的筛查策略,全面且准确地筛查了人类血清的脂肪酸及胆汁酸,具体工作内容如下:利用高分辨质谱对比脂肪酸与胆汁酸经N,N-二甲基乙二胺（DMED）衍生前后的多级质谱碎裂规律,详细阐述了衍生后的饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸和胆汁酸多级质谱碎裂规律与分子结构的联系,并建立了一套完整的质谱碎裂规律标准,用于筛查饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸和胆汁酸,并提供一定的结构信息。针对复杂样品中脂肪酸与胆汁酸的分析,我们以UPLC-ESI-LTQ-Orbitrap MS质谱为平台,基于DMED和d4-DMED稳定同位素标记后的脂肪酸与胆汁酸的碎裂规律创建了匹配的数据依赖扫描模式（Full scan-DDMS2-NL3）获取数据。在该扫描模式下,我们以上述建立的质谱碎裂规律筛查标准为核心,结合稳定同位素标记技术在定性时的优势,制定了一套按定性精度分级的筛查策略,该策略具有高灵敏度、高覆盖度,以及准确的定性能力。我们在人类血清样品中验证了筛查策略的可行性,并成功筛查出了12种饱和脂肪酸,50种不饱和脂肪酸（23种单不饱和脂肪酸与27种多不饱和脂肪酸）和14种胆汁酸,根据定性程度将其全部划分成了三个等级。结果中包含16种脂肪酸定性等级为一级,根据建立的筛查策略,我们合理地推测它们是存在于人类血清中还未被检测过的脂肪酸。