论文部分内容阅读
大球盖菇（Stropharia rugoso-annulata Farlow apud Murrill），是联合国粮农组织向发展中国家推荐的新菇种之一，也是国际菇类交易市场上的十大畅销品种之一。它富含蛋白质、多糖、矿质元素、维生素等生物活性物质，氨基酸含量达17种，人体必需氨基酸齐全。本文对大球盖菇的营养成分进行了分析测定，大球盖菇子实体粗蛋白含量为25.75％，粗脂肪为2.19％，粗纤维为7.99％，碳水化合物68.23％，氨基酸总量为16.72％，E／E+N及E／N比值分别为39.11％和0.64。矿质元素中磷和钾含量较高，分别为3.48％和0.82％。生物活性物质中的总黄酮、总皂甙及酚类的含量均大于0.1％，牛磺酸和Vc含量分别为81.5和53.1mg／100g。本文确定了大球盖菇多糖的最佳提取条件为提取温度100℃，醇析浓度80％，物料比1∶30。提取的粗多糖含量21.69％，粗多糖经溶解、脱蛋白、透析等步骤得到精制多糖，其多糖含量约为70.12％。将大球盖菇精制多糖分别用DEAE-Sephadex A-50离子交换柱及Sephadex G-100凝胶柱进行了初步分离纯化，经DEAE-Sephadex A-50离子交换层析分离后可以得到一个中性糖峰及多个带负电荷的多糖峰，分别收集多糖峰并醇沉得到4个多糖组分，其得率依次为17.13％、52.22％、11.00％和7.40％；经Sephadex G-100凝胶层析分离后，可将大球盖菇多糖分为大分子量多糖和小分子多糖两个部分，收集大分子多糖峰部分并醇沉，得大分子多糖得率为33.14％。大分子部分多糖的平均分子量约为610014。未粉碎、40目粗粉、100目细粉及300目超细粉4种粉碎程度的大球盖菇粉末水提取液清除DPPH自由基的的EC50在0.63～1.01mg／mL，醇提取液EC50在5.65～7.71mg／mL。对4种粉碎程度的大球盖菇多糖进行体内和体外抗氧化活性研究，结果表明：大球盖菇多糖能有效清除体外超氧阴离子自由基和羟自由基，4种样品清除超氧阴离子自由基的IC50分别为80.95、76.45、162.20和164.80 ug／ml，未粉碎多糖样品在浓度为583.1μg／ml时清除羟自由基达到98.72％；多糖抑制小鼠肝线粒体肿胀程度与浓度有一定量效关系，在500μg／mL时未粉碎、40目粗粉及300目超细粉对诱导产生的线粒体肿胀及线粒体自身氧化均有较好的抑制作用；多糖浓度在208μg／mL时抑制小鼠红细胞溶血最高可达68.6％；在肝匀浆自发氧化和Fe2++H2O2诱导氧化条件下，多糖（537μg／mL）对MDA生成的抑制率分别可达42.6％和46.8％。大球盖菇多糖对CCl4致氧化损伤小鼠肝和心SOD均有改善作用，心CuZn-SOD及总SOD活性提高了，MDA含量与模型组比降低，有显著性差异（P＜0.05或0.01）；肝的总SOD、Mn-SOD及CuZn-SOD活性均高于模型组，差异显著（P＜0.05或0.01）。各多糖治疗组小鼠肝和肾的GSH-Px活性均高于模型组，高剂量组差异极显著。大球盖菇多糖可降低D—半乳糖氧化损伤小鼠血清MDA含量、提高GSH-Px及TAOC；三个剂量组都可以提高血液SOD活性，并显著降低血液MDA含量（P＜0.01）；肝的SOD、Mn-SOD、CuZn-SOD活性及GSH-Px活性均得到了有效改善，其数值高于对照组，说明多糖提高了抗氧化酶系的活性，使肝组织抗氧化能力得到提高，同时各实验组肝MDA含量低于模型组，TAOC高于模型组。肝脏超显微结构观察结果显示模型组的双层膜结构受到严重损伤，细胞器相互融合，而多糖治疗组细胞形态得到了明显的修复和改善，各方面形态均与对照组接近，表现出多糖的抗氧化损伤的能力。抗氧化酶电泳图谱显示，CCl4致氧化损伤和D-半乳糖致氧化损伤小鼠的肝CAT酶活性模型组表现出代偿性增高，且同工酶谱带异常，其原因尚不清楚。