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目的:研究IgG4相关性疾病(IgG4-related disease,IgG4-RD)中滤泡辅助性T(Tfh)细胞及其亚型的表达及功能。方法:收集初治IgG4-RD患者的外周血及新鲜受累组织细胞悬液,同时收集性别、年龄相匹配的健康人作为对照,运用流式染色技术研究IgG4-RD患者外周血和组织中Tfh细胞及其亚型的表达;运用RT-PCR技术比较IgG4-RD患者和健康对照组中与Tfh表达密切相关的重要转录因子Bcl-6和Blimp-1以及与其功能密切相关的重要细胞因子IL-21在外周血中转录水平上表达的差异;运用免疫组化和免疫荧光技术定位IL-21和(CD4+CXCR5+)Tfh细胞在IgG4-RD受累组织中的分布;进一步通过将IgG4-RD患者的循环Tfh(cTfh)及其亚型分别与健康正常人的B细胞共培养,探索Tfh及其亚型在IgG4-RD中对B细胞增殖、细胞损伤、凋亡及分化分泌抗体的影响。结果:IgG4-RD患者外周血和受累组织中的(CD4+CXCR5+)T、(CD4+CXCR5+ICOS+)T、(CD4+CXCR5+PD-1+)T、(CD4+CXCR5+ICOS+PD-1+)T细胞群均较正常人比明显高表达,且这些细胞群在组织中的表达水平远远高于其在外周血中的表达,其中,(CD4+CXCR5+ICOS+PD-1+)T以及PD-1在(CD4+CXCR5+ICOS+)T细胞群中的表达水平与IgG4-RD患者的血清IgG、IgG4、IgG4/IgG水平及受累器官数目均呈显著正相关性,后者还与高分泌IgG4的浆母细胞(CD19+CD24-CD38hi)显著正相关。决定Tfh细胞表达的重要转录因子Bcl-6在IgG4-RD外周血CD4+T细胞中的转录水平较正常人无差异,而与Tfh功能相关的重要细胞因子IL-21的mRNA转录水平在IgG4-RD外周血中明显增高,且与IgG4、IgG、IgG4/IgG的水平呈显著正相关性。在IgG4-RD患者受累组织中,(CD4+CXCR5+)Tfh细胞和IL-21均显示为高表达,主要定位于腺体细胞或异位生发中心周围,部分为弥漫分布;较正常人而言,IgG4-RD的cTfh细胞更能促进B细胞增殖和加重细胞损伤,并抑制其凋亡,并且能更多地促使naive B细胞向(CD19+CD27+IgD-)switched(S)memory B细胞和(CD19+CD24-CD38hi)B亚群分化,从而产生分泌更多的IgG4抗体。进一步通过对cTfh细胞亚型的研究,我们发现,三种cTfh亚型在IgG4-RD中均具有很强的促进B细胞增殖并向S memory B细胞分化,而抑制其凋亡的功能,但主为cTfh1和cTfh2而非cTfh17在IgG4-RD中高表达,cTfh1和cTfh2均能促进B细胞向(CD19+CD24-CD38hi)B细胞亚群分化并产生分泌更多的IgG4抗体,以cTfh2细胞的能力更为显著。结论:Tfh在IgG4-RD的发病中起重要作用,(CD4+CXCR5+ICOS+)T细胞中PD-1的表达水平在促进GC中B细胞向分泌IgG4为主的浆细胞分化中起着关键的作用。主因cTfh细胞分泌的IL-21在IgG4-RD的发病机制中可能扮演着重要的角色。此外,IgG4-RD中的Tfh细胞功能异常活化,可显著促进B细胞的增殖、加重细胞损伤,抑制其凋亡,促进naive B细胞向switched(S)memory B细胞和(CD19+CD24-CD38hi)B 细胞亚群分化。其中,cTfh1 和 cTfh2 细胞在 IgG4-RD中高表达,具有促进IgG4-RD中B细胞向浆细胞分化及分泌IgG4抗体而抑制其凋亡的功能,且以cTfh2细胞最为显著。