花生粕固态发酵制备纳豆激酶和生物活性肽的工艺研究

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利用纳豆芽孢杆菌固态发酵花生粕,制备纳豆激酶(NK)、抗氧化活性物质、血管紧张素转换酶抑制肽(ACE抑制肽),为高值化利用花生粕提供理论和实践依据。论文共分为以下四个部分:1、纳豆芽孢杆菌固态发酵花生粕制备NK的工艺探究。以NK活力为指标,通过单因素和正交试验优化NK的制备工艺。NK的最佳发酵条件:温度37℃,发酵24 h,接种量10%,料水比1:0.4。在此条件下测得发酵产物NK活力为3162 U/m L,比单因素试验的最高活力提高18%(2680 U/m L),可溶性氮含量5.6 mg/m L。2、NK冷冻干燥保护剂的选择。通过单因素试验筛选出3种NK的有效冷冻保护剂,再经正交试验得到NK冻干保护剂的最佳配比组合为β-环糊精5%、麦芽糊精10%、辛烯基琥珀酸淀粉钠2%。在此条件下,NK活力保存率可达74.2%,明显优于使用单一保护剂。经人工胃液和肠液处理一定时间后,NK活力保存率为49.3%。3、纳豆芽孢杆菌固态发酵花生粕制备抗氧化物。以羟自由基清除率和铁还原力为评价指标,采用单因素和响应面试验相结合的方法,探索纳豆芽孢杆菌固态发酵花生粕制备抗氧化物的工艺。花生粕抗氧化物的最佳制备工艺条件:37℃下接种量6.8%,发酵时间38 h,料水比1:0.4。在此发酵条件下测得发酵液对羟自由基的清除率为84%,铁还原力吸光度为0.21,对1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基的清除率为74%,NK活力1360 U/g,多肽吸光度为0.335。4、纳豆芽孢杆菌固态发酵花生粕制备ACE抑制肽。以发酵产物的ACE抑制率为评价指标,采用单因素和响应面试验相结合的方法,探索制备ACE抑制肽的工艺。其最佳制备工艺条件:接种量4.6%,发酵时间33h,温度37℃。在此发酵条件下测得发酵液的ACE抑制率73%,NK活力达到1400 U/g,对羟自由基的清除率为64%,铁还原力吸光度为0.14。
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