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目的热处理壮药“国虾薄”(绞股蓝)较原药材具有良好的抗肿瘤活性,前期研究表明其主要抗肿瘤活性成分为皂苷类。通过生物活性跟踪方法发现热处理绞股蓝中的微量皂苷成分具有较强的抑制肺癌A549细胞增殖作用,本论文旨在进一步明确热处理绞股蓝中的微量皂苷成分。方法1.利用HPLC-UV-BIO法筛选热处理中绞股蓝微量皂苷活性部位。2.利用加热回流法制备热处理绞股蓝总提物,并利用硅胶柱色谱、半制备色谱对热处理绞股蓝总提物中微量皂苷成分进行分离和纯化,获得微量皂苷单体成分,并对其进行结构鉴定。3.通过乙酰化方法获得热处理绞股蓝中微量皂苷成分,利用半制备色谱进行分离纯化。利用MS、NMR等数据对所分离得到的化合物进行结构鉴定。4.利用CCK8法检测绞股蓝皂苷对人的四种恶性肿瘤细胞(肺癌细胞A549、肝癌细胞HepG2、胃癌细胞SGC7901、前列腺癌细胞PC-3)的增殖抑制作用,计算半数抑制浓度IC50值,探讨构效关系。结果1.从热处理绞股蓝中分离得到绞股蓝皂苷Gypenoside L、Gypenoside LI、DamulinA、DamulinB四个主要成分之外,还分离得到人参皂苷20(R)-Rg3和20(S)-Rg3;在热处理绞股蓝微量皂苷富集部位发现准分子离子峰为m/z 841.4874[M-H]-及相关离子峰m/z 887.4927[M+HCOOH-H]-结合分子量分析,其可能为绞股蓝皂苷Gypenoside L或Gypenoside LI的单乙酰化化合物。2.利用Gypenoside L和Gypenoside LI作为前体化合物,冰醋酸作为乙酰化试剂,进行乙酰化反应,用半制备HPLC对反应产物进行分离,获得四种单乙酰化产物,分别鉴定为6’-acety1-gypenoside L、6’-acetyl-gypenoside LI、4’-acetyl-gypenoside L、4’-acetyl-gypenoside LI,通过 LC/MS 比对,4’-acetyl-gypenoside L为热处理绞股蓝中的微量皂苷成分。3.通过 CCK8 法,对 20(R)-Rg3、20(S)-Rg3、Gypenoside L、Gypenoside LI、6’-acetyl-gypenoside L、6’-acetyl-gypenosideLI、4’-acetyl-gypenosideL、4’-acetyl-gypenoside LI进行肺癌细胞A549、肝癌细胞HepG2、胃癌细胞SGC7901、前列腺癌细胞PC-3的增殖抑制作用筛选,发现四种单乙酰化产物相对于Gypenoside L、Gypenoside LI而言,其抗癌细胞活性相似,没有显著性差异。且6’位单乙酰化合物抗肿瘤活性强于4’位单乙酰化合物抗肿瘤活性,20(R)构型比20(S)构型结构活性更强。结论1.热处理国虾薄中微量皂苷成分在抗肿瘤作用中也具有一定作用,这丰富了国虾薄抗肿瘤作用的物质基础。2.对于含量极其微量的成分,可以通过先从药材中获得结构相似的成分作为前体化合物,后经简单化学修饰手段快速获得,同时获得系列有价值的副产物,这为新型活性天然产物的获得提供了思路。