普鲁兰的发酵及改性研究

被引量 : 7次 | 上传用户:xiaoyeziagan
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本论文优化了生产普鲁兰的培养基及其培养条件;探索了普鲁兰的生产工艺;研究了以普鲁兰酶水解普鲁兰生产麦芽三糖的生产工艺;研究了以丙烯酸甲酯为单体,在氮气保护下对普鲁兰进行接枝共聚制作吸水树脂的反应条件。以出芽短梗霉AP329为菌株,以甘薯淀粉水解物为碳源发酵生产普鲁兰。仅用a—淀粉酶水解,普鲁兰和生物量的产量都很低;继续用β—淀粉酶和普鲁兰酶水解,普鲁兰和生物量的产量增加;但用糖化酶进一步水解,普鲁兰和生物量的产量并没有得到进一步的提高。在DE值为48时,普鲁兰和生物量的产量达到最高。适宜的pH为5.5,发酵时间为4d。HPLC测定结果表明,普鲁兰的分子量为420000Da,比以蔗糖作为碳源时的分子量高近1倍。优化后培养基的组成为(g/L):甘薯淀粉水解物50、酵母抽出物2.0、磷酸二氢钾5.0、硫酸铵0.6、氯化钾0.5、结晶硫酸镁0.2、氯化钠1.0和1L蒸馏水,pH 5.5。应用新的培养基经过4d的发酵,普鲁兰的产量提高了50%以上,得率为52.42%(w/w)。实验研究结果表明,甘薯淀粉水解物是生产普鲁兰的良好碳源。普鲁兰产量受氮源的种类及浓度的影响,过高的浓度使产量降低。以亚硝酸钠为氮源时的适宜质量浓度为0.3g/L,而以硫酸铵为氮源时的适宜质量浓度为0.6g/L。但生物量随氮源浓度增加而升高。初始pH值对普鲁兰产量的影响与氮源密切相关,以亚硝酸钠为氮源时的适宜初始pH为6.5,而以硫酸铵为氮源时的适宜初始pH为5.5。优化后培养基组成为(g/L):甘薯淀粉水解物50、酵母抽出物2.0、磷酸二氢钾5.0、亚硝酸钠0.3、氯化钾0.5、结晶硫酸镁0.2、氯化钠1.0和1L蒸馏水,pH 6.5。应用新的培养基经过4d的发酵,普鲁兰的产量进一步提高了约10%,得率为57.22%(w/w)。实验研究结果表明,亚硝酸钠是生产普鲁兰的良好氮源。从发酵液中获得普鲁兰的必需生产工艺为:热处理、分离、浓缩、脱色、沉淀、干燥。在保持温度为80℃,经过20分钟的热处理,不仅可以杀灭菌体,而且可以脱去86.19%(w/w)的蛋白质,对普鲁兰的回收率却没有影响;经过热处理的发酵液在10000r/min 15min下可离心除去菌体细胞;经过离心的黑绿色发酵液经真空浓缩至10%(w/v)后以4%(v/v)双氧水为脱色剂,在温度60℃、pH 10条件下脱色60mmin,可以脱去色素。经过脱色的发酵液用酒精沉淀,沉淀在90℃下烘干30mmin得到产品,该产品在颜色、质地等方面的特性与商业样品的类似,得率为62.31%(w/w)。以普鲁兰为底物,以普鲁兰酶为水解酶,研究生产麦芽三糖的工艺条件。实验结果表明:最适pH值是5.0左右、水解温度为45℃、水解时间是6h、底物浓度为3%(w/v)、酶浓度是10ASPU/g。过高或过低的pH值、水解温度和底物浓度则降低了水解液的DE。进一步延长反应时间或增加酶浓度,水解液的DE值没有得到提高。水解液灭酶(90℃,20min)后用截留分子量为1000Da的滤膜过滤,浓缩至20%(w/v),然后以8倍体积的乙醇沉淀,最后在80℃下干燥2h得到麦芽三糖粉末,经过高效液相色谱检测,其纯度可达93.5%(w/W),得率为83.7%(w/w,普鲁兰)和49.9%(w/w,甘薯淀粉)。以丙烯酸甲酯为单体,以硝酸铈铵为引发剂,对普鲁兰进行接枝共聚。研究发现,反应的最适引发剂浓度为0.004 mol/1、单体浓度为0.0465 mol/1、时间为180 min、温度为40℃。过高的引发剂浓度、单体浓度和温度则降低了接枝率;进一步延长反应时间,接枝率没有得到进一步的提高。重量法及产物的红外光谱图谱证实了接枝共聚反应的发生。共聚物的应用之一是可以作为吸水树脂,其吸水性能与接枝率有关。当接枝率低于15.3%(w/w)时,吸水性能随接枝率的增加而增强;当接枝率高于15.3%(w/w)时,吸水性能随接枝率的增加反而下降。在接枝率为15.3%(w/w)时,吸水性能达到最高,为吸水树脂质量的380倍。
其他文献
文章搜集、整理了民国时期中国人口的死亡率资料,认为该时期粗死亡率在25‰~35‰之间,婴儿死亡率可能在170‰~200‰之间,出生时平均预期寿命随着地区和时期的不同,有着较大差异
以初步纯化的叶绿素为原料,利用叶绿素酶水解、选择性酸降解两种方法制备脱镁叶绿酸。高效液相色谱分析显示两种方法得到的产物图谱相似,酸降解产物中脱镁叶绿酸A的含量较高
花类药气味芬芳、药效平和,多为轻灵活泼、药性流通之品,治疗脾胃病尤其是调节脾胃气机升降甚是恰当,具体临床应用如以葛花、旋覆花升清降浊,以扁豆花、厚朴花化湿和胃,以玫
<正> 海尔集团公司是以青岛海尔电冰箱股份有限公司为龙头,联合青岛电冰柜总厂、青岛空调器厂、青岛微波电器厂、青岛船用电冰箱厂、青岛海尔塑料厂、青岛海尔商业发展公司、
以220kV交流芯式电力变压器为例,分别对天然酯油、矿物油及其浸渍纸板件的绝缘性能进行了对比,从理论上分析了天然酯油对变压器主绝缘结构设计造成的影响。
什么是经济增长?简单地说,就是指一个国家在一定时期内国民财富的的实际增加量或实际增长速度。一般用国内生产总值(GDP)的增长率、人均国民生产总值(GNPpercapita)增长率或人均国民收入(NIpercapita)增长率来
伏安特性曲线作为在u-i平面内建立起来的图像,最常用来描述元件的性质。本文通过对一端口网络的伏安特性曲线进行分析,利用其性质证明了替代定理,给出了一般非线性电路的分析
随着世界经济全球化和区域经济一体化的发展,城市群之间的竞争日益成为国家之间、区域之间竞争的主体力量,而衡量一个城市群建设成功与否的重要标志就在于该城市群是否具有竞
随着企业之间竞争的加剧,企业已经开始逐渐意识到企业之间的竞争已经不是某一点的竞争,而是上升到整个商业模式层面的竞争,企业商业模式已成为现代企业成功的关键。本文选取
在筛选新免疫抑制剂的过程中,从海洋青铜小单孢菌Micromonosporachalcea.FIM02-523发酵液提取到脂肽类化合物FW523,经纯化得到5个组分。组分3(FW523-3)与抗肿瘤抗生素rakicid