抗性糊精对糖尿病小鼠降糖作用的研究

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随着经济发展和生活节奏的加快,我国患慢性疾病的人数不断攀升,已高达3亿人左右,其中糖尿病患者人数接近1.41亿,位于世界首位。目前,Ⅱ型糖尿病的治疗包括药物治疗、运动治疗和饮食治疗等手段,其中饮食治疗因其安全有效、毒副作用小等优点,日益受到重视。前期研究表明,抗性糊精可以改善机体血糖代谢,但其降糖作用机制尚不明确。因此,本文基于体外模拟消化、动物实验等手段,结合肠道菌群分析、代谢组学等技术,系统研究了抗性糊精的降糖作用及其机制,为后续植物源降糖功能产品的开发提供理论依据。研究内容和结果如下:(1)系统分析了抗性糊精的流变学特性和结构表征:采用多功能流变仪研究抗性糊精在20℃-60℃黏度变化情况,发现在20/s剪切速率,抗性糊精-水溶液的黏度随温度升高逐渐降低最后趋于稳定,且高浓度抗性糊精-水溶液的黏度高于低浓度抗性糊精-水溶液的黏度;在25℃,抗性糊精-水溶液在低剪切速率(<1/s),表现出剪切力稀化现象,之后黏度不再发生明显变化;采用热场扫描电子显微镜观察了抗性糊精的微观结构,结果表明,抗性糊精的形貌呈大小不均等的颗粒状,且表面凹凸不平、有划痕、圆斑,甚至球体被破坏。研究结果为抗性糊精的进一步开发利用提供了基础数据。(2)采用体外模拟胃肠消化和体外发酵实验,研究抗性糊精的消化特性。采用复合酶体外水解法手段,探明抗性糊精的血糖生成指数(GI)值为52.75,属于低GI食品;体外模拟消化结果表明,仅有小部分抗性糊精能够在胃液、肠液中被消化水解,其消化水解率分别为0.67%、4.52%;体外发酵结果表明,相比对照组,抗性糊精可显著提高乙酸和丁酸的含量。(3)利用db/db糖尿病小鼠研究抗性糊精对Ⅱ型糖尿病小鼠健康的影响。将db/db糖尿病小鼠随机分为糖尿病模型对照组和5%抗性糊精干预组,持续喂养32周,结果表明,抗性糊精可以有效降低Ⅱ型糖尿病小鼠的饮食量和体重;明显改善Ⅱ型糖尿病小鼠的血糖指标、血脂指标、肝功指标;另外,抗性糊精在一定程度上修复了Ⅱ型糖尿病小鼠的肝脏、肾脏、胰腺、骨骼肌组织病理损伤;抗性糊精显著增加了Ⅱ型糖尿病小鼠肠道内容物中丙酸、异丁酸和戊酸含量。(4)采用16S rRNA测序法对比了三组小鼠肠道内容物中的微生物群落,发现抗性糊精干预显著提高了Ⅱ型糖尿病小鼠的肠道菌群多样性和丰度,主要表现在下调肠道中g_Escherichia_Shigella、f_Clostridiaceac_1等菌群相对丰度,上调肠道中g_uncultured_bacterium_f_Muribaculaceae、g_uncultured_bacterium_f_Lachnospiraceae、g_Parabacteroides、g_Ruminiclostridium_5、f_Prevotellaceae、g_Alloprevotella、f_Christensenellaceae等菌群相对丰度。(5)基于ACQUITY UPLC I-Class plus超高效液相串联QE高分辨质谱仪对小鼠血清代谢组学进行分析。结果表明:不同组的小鼠血清代谢物在主成分分析图中均有明显分离;抗性糊精可以回调Ⅱ型糖尿病小鼠血清中磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱、花生四烯酸代谢物等含量;通过对代谢物与肠道菌群进行相关性分析发现,抗性糊精能够通过调节肠道中g_Parabacteroide、g_uncultured_bacterium_f_Lachnospiracea、g_Ruminiclostridium等菌群丰度,从而参与血清中甘油磷脂代谢等信号通路,最终调节机体糖脂代谢物水平实现Ⅱ型糖尿病的改善。
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