研究背景：母乳是新生儿营养的―金标准，是危重新生儿，包括早产儿、极低出生体重儿最适宜的营养食品。糖巨肽（GMP）是乳中的κ-酪蛋白被凝乳酶（chymosin，rennin）或胃蛋白酶（pepsin）水解后所产生的多肽片段。GMP具备许多生物活性，如能抑制胃酸的分泌；调节免疫系统反应；抑制病原体黏附至细胞；结合霍乱和埃希氏大肠杆菌的肠毒素；促进双歧杆菌的生长等。另外，GMP不含任何芳香族氨基酸，故可作为苯丙酮尿症患儿膳食中的首选成分。补充GMP还可增加锌的吸收。因此，GMP对于新生儿的生长发育十分有益。目前，我国关于GMP的商品化生产、强化食品的研发基本处于起步状态。基于中国人群母乳中GMP的研究，对于优化婴儿配方乳及保健食品的开发具有重要意义。　　前期的研究发现人乳中GMP含量显著高于配方奶粉，但由于当时仅收集了广州地区部分人群中的初乳和成熟乳，样本量较小且局限。故本研究改进了实验方法，对多个地区、不同阶段的母乳样本进行检测，以期更准确地测定和反映中国产妇母乳中GMP的含量。　　另外，人乳和牛乳中糖巨肽的结构、含量均具有一定的差异，目前关于两者生物活性差异的研究也十分有限。如何在婴儿配方乳中适当的添加牛乳GMP还缺乏理论依据。因此，针对GMP的许多生物活性，我们将选取其中的促双岐杆菌增殖的活性进行对比研究，了解人乳及牛乳GMP的活性差异以及两者的量效关系。以上这些研究都将为优质模拟婴儿配方乳开发提供一些理论依据。　　目的：　　1.测定中国部分地区产妇不同阶段母乳中糖巨肽（GMP）含量及其差异，了解地区、早产和泌乳期因素对母乳中GMP含量的影响，为进一步优化配方奶成分提供依据。　　2.比较母乳与配方奶粉中糖巨肽（GMP）促婴儿双歧杆菌增殖的活性差异以及量效关系，为优质模拟婴儿配方乳开发提供一些理论依据。　　方法：　　1.按一定条件选取广州、上海、靖江三地的产妇共计594例，按地区，孕龄（早产、足月产），产后日龄（初乳、过渡乳、成熟乳）将样本分为18个组，每位产妇收集前段母乳5ml，然后通过凝乳酶酶解等步骤处理样品，检测其中唾液酸含量，以唾液酸的含量来表示样品中GMP含量。　　2．通过脱脂、调节等电点、离心的方法从母乳中分离出酪蛋白，然后用凝乳酶水解酪蛋白进而分离出 GMP，最后使用超滤和离子交换色谱法纯化人乳GMP。将牛乳GMP及人乳GMP按一定浓度添加至婴儿双歧杆菌液体培养基，进行厌氧培养，通过比浊法（检测培养基OD600nm值）确定细菌浓度，比较两者促进婴儿双歧杆菌增殖活性的差异。　　结果：　　1.广州、上海、靖江三地产妇不同阶段母乳中糖巨肽含量分析　　1.1凝乳酶处理样本的最佳条件为：酶浓度为0.25mg/ml，酶解时间为120min。　　1.2广州、上海、靖江三地共收集母乳594例，其中广州地区182例，包括早产95例，足月90例；上海地区213例，包括早产97例，足月116例；靖江地区196例，包括早产90例，足月106例。　　1.3产后不同时期的GMP含量比较：初乳（195例）、过渡乳（185例）和成熟乳（214例）的唾液酸含量分别为（1531.53±256.72）mg/L、（1423.15±198.33）mg/L、（1153.04±210.19）mg/L，三组间比较，差异有统计学意义。其中初乳最高，成熟乳最低。　　1.4广州、上海和靖江三地区间的GMP含量比较：早产初乳中GMP含量分别为（1407.98±305.66）mg/L、（1567.93±266.51）mg/L、（1532.81±275.88）mg/L，三地区间比较，差异无统计学意义；早产过渡乳中GMP含量分别为（1478.36±167.85）mg/L、（1374.03±180.70）mg/L、（1390.32±243.83）mg/L，三地区间比较，差异无统计学意义；早产成熟乳中GMP含量分别为（1190.15±237.95）mg/L、（1164.70±231.24）mg/L、（1271.49±157.75）mg/L，三地区间比较，差异无统计学意义；足月初乳中GMP含量分别为（1564.77±184.60）mg/L、（1583.52±200.22）mg/L、（1531.10±266.03）mg/L，三地区间比较，差异无统计学意义；足月过渡乳中GMP含量分别为（1422.80±188.55）mg/L、（1466.18±133.00）mg/L、（1411.88±247.65）mg/L，三地区间比较，差异无统计学意义；足月成熟乳中GMP含量分别为（1059.96±182.59）mg/L、（1037.94±146.53）mg/L、（1224.82±206.62）mg/L，三地区间比较，差异有统计学意义，靖江地区足月成熟乳中GMP含量高于广州和上海地区，后两者间比较，差异无统计学意义。　　1.5早产组与足月组间的 GMP含量比较：初乳中GMP含量分别为（1501.00±289.31）mg/L、（1561.73±217.06）mg/L，两者间比较，差异无统计学意义；过渡乳中GMP含量分别为（1413.22±202.28） mg/L、（1433.62±194.65）mg/L，两者间比较，差异无统计学意义；成熟乳中GMP含量分别为（1208.78±214.66）mg/L、（1112.59±198.10）mg/L，两者间比较，差异有统计学意义，早产成熟乳较足月成熟乳GMP含量更高。　　2.人乳和牛乳GMP促进双歧杆菌增殖活性的研究　　2.1当pH=4.3，离心力为40000 g，CaCl2溶液浓度为60mmol/L时，人乳酪蛋白的分离效果最好。通过超滤和离子交换色谱纯化的 GMP浓度为1712.20mg/L，纯度为80.3％。　　2.2将培养基中GMP浓度在250mg/L~2000mg/L的范围内增加其初始浓度，可以提高双歧杆菌的菌体浓度和增殖速率。当培养36h，不同GMP浓度下，双歧杆菌的生长均处于对数生长期，因此选取培养36h作为双歧杆菌浓度的观察时间点。　　2.3当培养36h，培养基中GMP浓度分别为1000mg/L、1500mg/L、2000mg/L和3000mg/L时，人乳GMP培养基中的双歧杆菌浓度均大于牛乳GMP培养基。培养基中GMP浓度分别为250mg/L、500mg/L时，人乳GMP培养基中的双歧杆菌浓度与牛乳 GMP培养基中浓度相比，差异无统计学意义。　　结论：　　1.随着初乳向成熟乳的过度，母乳中的GMP含量呈下降趋势，初乳中GMP含量最高；早产成熟乳GMP含量高于足月成熟乳，有利于早产儿的后期喂养；地区因素对母乳GMP含量的影响较小。　　2.牛乳GMP及人乳GMP在体外均具有促进婴儿双歧杆菌增殖的活性；相同浓度的人乳GMP促双歧杆菌增殖的活性大于牛乳GMP。