纤维素降解菌株的筛选及诱变研究

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本研究广泛采集自然界中富含纤维素的环境标本,以滤纸为唯一碳源进行培养,分离纯化得到53株真菌菌株。以纤维素刚果红平板法对这些真菌进行初步筛选,获得产纤维素酶菌株10株。经DNS(3,5-二硝基水杨酸)酶活测定法(简称DNS法)进行复筛,获得了2株FPA酶活(filter paper activity,滤纸酶活,也称全酶活)和CMC酶活(carboxymethyl cellulase,羧甲基纤维素钠酶活,简称CMC酶活,也称内切葡聚糖酶活)均较高的菌株。经鉴定分别为烟曲霉(Aspergillus fumigatus,编号为S69)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum,编号为S62)。其中,菌株S69的FPA酶活力为306.76 U/mL,CMC酶活力为548.17 U/mL;菌株S62的FPA酶活为281.55 U/mL,CMC酶活为540.7 U/mL。将上述烟曲霉S69在不同营养环境和培养条件下发酵培养,以优化其产酶条件。最终确定了该菌的最佳产酶条件,在此培养条件下,FPA酶活力达到484.13 U/mL,比优化前提高了57.82%;CMC酶活力达到880.51 U/mL,比优化前提高了62.85%。为进一步提高菌株的产酶活力,应用紫外线照射、EMS(甲基磺酸乙酯)处理及二者复合作用的方法对烟曲霉S69进行诱变。最终获得了6株酶活力提高的突变株,其中,突变株S69-E7的FPA酶活力提高最多,较诱变前提高了16.5%,S69-U3的CMC酶活力提高最多,较诱变前提高了6.25%。本研究得到了降解纤维素能力较强的真菌菌株烟曲霉S69,并对其最佳产酶条件进行了优化,同时,经诱变育种提高了其产酶活力,为以后的基础研究及生产应用提供了菌株资源和实验基础。
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