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目的:原肌球蛋白-1(tropomyosin-1,TPM1)是一种广泛表达的肌动蛋白结合蛋白,在许多恶性肿瘤中表达水平降低,并与癌症进展相关。有实验研究表明TPM1的异常表达与肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)细胞凋亡密切相关,即TPM1表达增加可以诱导肾癌细胞凋亡,但其具体机制尚不明确。本研究旨在进一步研究TPM1过表达促进肾癌细胞发生凋亡的具体机制,并探讨其在RCC细胞系中的其他作用及其潜在机制。方法:1.五种不同质粒瞬时转染RCC细胞786-O和ACHN2.细胞活性实验:检测TPM1表达对RCC增殖的影响3.DAPI染色实验:检测RCC细胞核的变化4.单细胞凝胶电泳实验:检测RCC细胞DNA损伤5.流式细胞技术:检测RCC细胞的凋亡率6.蛋白质免疫印迹实验:检测与凋亡有关的蛋白质表达水平结果:1.五种质粒瞬时转染RCC细胞786-O和ACHN后,除过表达质粒组pEX4-TPM1(over-expression group OE)与敲低表达质粒组(pGPU6/GFP/Neo-shTPM1 knockdown group KD)中TPM1蛋白表达增加和降低外,其余三组即:过表达对照组(pEX4-NC,OE-NC),敲低对照组(pGPU6/GFP/Neo-shNC,KD-NC)及空白组中TPM1表达无明显变化。2.MTT实验结果显示在RCC细胞786-O中TPM1表达增加会抑制细胞的增殖,而在ACHN细胞中并无明显作用。3.DAPI实验结果显示在RCC细胞786-O和ACHN中,TPM1过表达组较其阴性对照组具有更高的凋亡率,在两种RCC细胞中TPM1敲低组与其阴性对照组之间均未观察到显著差异。4.PI/Annexin-V-FITC双染色后使用流式细胞仪检测肾癌细胞的凋亡率。实验结果表明TPM1表达增加可以促进两种RCC细胞发生凋亡,而TPM1表达降低却对细胞无太大影响.5.单细胞凝胶电泳(彗星实验):实验结果表明,TPM1的过表达可明显诱导786-O细胞和部分ACHN细胞中DNA损伤和DNA双链断裂。6.蛋白质免疫印迹实验结果表明TPM1表达增加明显减少了抗凋亡因子Bcl-2的表达,同时它增加了促凋亡因子Bax,P53和Caspase-3的表达。结论:1.TPM1表达增加可以抑制肾癌细胞786-O的增殖2.TPM1通过P53介导的线粒体途径促进肾癌细胞凋亡