不同种类B族维生素和复方丹参滴丸对高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响

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背景:高尿酸血症(Hyperuricemia,HUA)是心血管疾病和代谢性疾病的重要危险因素和预测因子,血尿酸升高可以引起血管内皮功能紊乱,诱发多种心脑血管疾病。另外高尿酸血症还与胰岛素抵抗、血脂代谢紊乱、肾脏功能不全等多种疾病的发生发展有密切关系。临床常用的降尿酸药物如苯溴马隆、丙磺舒、别嘌呤醇等,毒副作用多,疗效不确切。在既往研究中,通过使用一定剂量的酵母膏+乙胺丁醇连续灌胃,已经成功建立了小鼠高尿酸血症模型,证明了联合给予维生素B6、维生素B12和叶酸,可以显著降低高尿酸血症模型小鼠的血尿酸水平,并对血管内皮具有一定的保护作用。但是不同种类的B族维生素单独使用,对高尿酸血症小鼠的血尿酸水平降低幅度究竟如何,尚未进行比较;哪一种B族维生素具有更好的保护血管内皮的作用,也还不十分明确。复方丹参滴丸对冠心病心绞痛、高血压左室肥厚、高血脂、肾功能不全等多种疾病均有显著的治疗作用,但是复方丹参滴丸是否具有降低尿酸作用,其对于血管内皮保护的作用如何,尚未进行具体的研究。目的:通过酵母膏+乙胺丁醇灌胃的方法,建立高尿酸血症小鼠模型。分别观察不同种类B族维生素和复方丹参滴丸对高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响,比较不同种类B族维生素及复方丹参滴丸降尿酸的效果,分析其机制,为临床降尿酸治疗提供指导;同时探索和比较不同种类B族维生素及复方丹参滴丸对血管内皮的保护作用,探讨尿酸引起血管内皮功能紊乱的机制。方法:选取90只SPF级雄性昆明种小鼠,按照体重随机分为7组,其中对照组12只(酵母膏+乙胺丁醇+蒸馏水灌胃),别嘌呤醇组13只(酵母膏+乙胺丁醇+别嘌呤醇灌胃),维生素B2组13只(酵母膏+乙胺丁醇+维生素B2灌胃),维生素B6组13只(酵母膏+乙胺丁醇+维生素B6灌胃),维生素B12组13只(酵母膏+乙胺丁醇+维生素B12灌胃),叶酸组13只(酵母膏+乙胺丁醇+叶酸灌胃),复方丹参滴丸组13只(酵母膏+乙胺丁醇+复方丹参滴丸灌胃)。连续给药3周后称量体重,摘眼球取血,测各组小鼠血清尿酸(serum uric acid,SUA)、血清一氧化氮(nitric oxide, NO)和血清内皮素(endothelin, ET)水平;分离小鼠胸腹主动脉,石蜡包埋、切片后HE染色,并进行免疫组化检测核转录因子-KB(nuclear transcription factor-κB, NF-κB)和血管内皮细胞粘附因子-1(vascular endothelial cell adhesion molecule-1, VCAM-1)的蛋白表达。结果:1、血清尿酸水平方面,各实验组(别嘌呤醇、B2、B6、B12、叶酸、丹参)与对照组相比均有显著差异(P<0.01);别嘌呤醇组与B6组、B12组和叶酸组相比无明显统计学差异(P>0.05);别嘌呤醇组与B2组和丹参组相比存在明显统计学差异(P<0.01);丹参组与B族维生素各组之间均有显著统计学差异(P<0.01)。2、血清一氧化氮水平方面,各实验组与对照组相比均有显著差异(P<0.01)。B2组、B12组、丹参组与别嘌呤醇组相比存在显著统计学差异(P<0.01)。B6组、叶酸组与别嘌呤醇组相比无明显统计学差异(P>0.05)。丹参组与B族维生素各组之间比较均有显著统计学差异(P<0.01)。3、与对照组相比,各实验组血内皮素-1水平未发现明显统计学差异(P>0.05)。4、对照组主动脉内膜NF-κB可见连续阳性表达,其他各实验组主动脉内膜NF-κB的表达均表现出不同程度的减弱。5、对照组主动脉内膜VCAM-1可见连续阳性表达,而其他各实验组主动脉内膜VCAM-1的表达同样表现出不同程度的减弱。6、在实验周期内,各实验组的主动脉内膜形态和血管壁结构均未发生改变。结论:1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、叶酸和复方丹参滴丸均可有效降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平。其中维生素B6、维生素B12和叶酸与别嘌呤醇降低尿酸的效果基本等同,维生素B2对尿酸的降低程度可能不及别嘌呤醇,复方丹参滴丸较别嘌呤醇降低尿酸的效果更加显著,同时也优于各类B族维生素。2、高尿酸血症引起血管内皮细胞功能损伤,表现为血清NO水平降低,而维生素B2、维生素B6、维生素B12、叶酸和复方丹参滴丸均可有效提升血清NO水平,其中复方丹参滴丸的效果更显著。3、各类B族维生素和复方丹参滴丸对于血清内皮素-1的改变未见显著的统计学差异,考虑与实验周期较短和(或)给药剂量不够充分有一定关系。4、别嘌呤醇、维生素B2、维生素B6、维生素B12、叶酸和复方丹参滴丸均可不同程度地抑制小鼠主动脉内膜NF-κB和VCAM-1的表达。
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